大腸桿菌IMVC生化鑒定套裝
發(fā)布時(shí)間：
2022-11-16
作者：
配置好的生物培養(yǎng)基 日水生物
大腸桿菌IMVC生化鑒定套裝（GB、SN）
（含2支緩沖蛋白胨水、1支蛋白胨水、1支Korser氏檸檬酸鹽肉湯）
用來測(cè)定菌的生理生化特征的4個(gè)實(shí)驗(yàn):
I吲哚試驗(yàn)
M:甲基紅試驗(yàn)
V:V.P試驗(yàn)
C:檸檬酸實(shí)驗(yàn)
1.吲哚試驗(yàn):（1）原理：一些細(xì)菌（如大腸埃希菌、變形桿菌、霍亂弧菌等）能分解培養(yǎng)基中的色氨酸生成吲哚(靛基質(zhì))，經(jīng)與試劑中的對(duì)二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈紅色，則為吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性。
2.（2）方法：將試驗(yàn)菌用蛋白胨水培養(yǎng)基30~35℃培養(yǎng)24小時(shí)滴加吲哚試劑2~4滴呈玫瑰紅的為陽(yáng)性不變色的為陰性。
3.MR-VP試驗(yàn)包括甲基紅試驗(yàn)和VP試驗(yàn)。
A.甲基紅試驗(yàn)
(1)原理:一些細(xì)菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步代謝分解為乳酸、甲酸、乙酸，使培養(yǎng)基的pH下降到4.5 以下，加入甲基紅指示劑即顯紅色(甲基紅變紅的范圍為pH4.4~6.0) ; 某些細(xì)菌雖能分解葡萄糖，但產(chǎn)酸量少，培養(yǎng)基的pH 在6.2 以上，加入甲基紅指示劑呈黃色。
(2) 方法: 將待檢菌接種至葡萄糖蛋白陳水培養(yǎng)基中， 30~35℃ 培養(yǎng)24h，加入甲基紅試劑2 滴， 立即觀察結(jié)果。
(3) 結(jié)果判斷: 紅色者為陽(yáng)性，黃色者為陰性。
VP ( Voges-Proskaurer) 試驗(yàn)
(1)原理: 某些細(xì)菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，并進(jìn)一步將丙酮酸脫羧成為乙酰甲基甲醇，后者在堿性環(huán)境中被空氣中的氧氧化成為二乙酰，進(jìn)而與培養(yǎng)基中的精氨酸等所含的胍基結(jié)合，形成紅色的化合物，即VP試驗(yàn)陽(yáng)性。
(2) 方法: 將待檢菌接種至葡萄糖蛋白臟水培養(yǎng)基中，30~35℃培養(yǎng)24h，加入VP 試劑 甲液6滴-乙液2滴，混勻后30~35℃培養(yǎng)30 min ，觀察結(jié)果紅色者為陽(yáng)性，陰性結(jié)果常呈灰色、白色或無色。有些細(xì)菌可能會(huì)出現(xiàn)反應(yīng)遲緩的情況，滴加試劑后若為陰性，應(yīng)于培養(yǎng)中繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)，4小時(shí)內(nèi)未變紅者判為陰性。
4.檸檬酸實(shí)驗(yàn)
（1）原理：有的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌，能利用檸檬酸鈉為碳源，因此能在檸檬酸鹽培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，并分解檸檬酸鹽后產(chǎn)生碳酸鹽，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性。此時(shí)培養(yǎng)基中的溴麝香草酚藍(lán)指示劑由綠色變?yōu)樯钏{(lán)色。不能利用檸檬酸鹽為碳源的細(xì)菌，在該培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，培養(yǎng)基不變色。
（2）方法：將試驗(yàn)菌培養(yǎng)在檸檬酸鹽培養(yǎng)基斜面上37℃培養(yǎng)24h觀察有無細(xì)菌生長(zhǎng)與培養(yǎng)基顏色變化如果含有溴麝香草酚藍(lán)的斜面藍(lán)色者為陽(yáng)性，反應(yīng)呈綠色的為陰性，反應(yīng)含苯酚紅的斜面如果呈紅色為陽(yáng)性，反應(yīng)呈黃色為陰性反應(yīng)。