GB5009.211-2014食品中葉酸的測定用培養(yǎng)基
發(fā)布時間：
2022-12-24
作者：
GB5009/5413系列相關(guān)培養(yǎng)基的用途及特點
四.GB5009.211-2014食品中葉酸的測定
1.定義：葉酸（folicacid）也叫維生素B9,是一種水溶性維生素.0.4毫克葉酸用于預(yù)防胎兒神經(jīng)管畸形,斯利安葉酸項目研究,經(jīng)過全國25萬例中美預(yù)防神經(jīng)管畸形合作項目驗證 ,準(zhǔn)媽媽在備孕期間就服用0.4毫克葉酸可以下降胎兒神經(jīng)管畸形率85%,此項結(jié)果至今被全球50多個國家廣泛應(yīng)用.0.5毫克葉酸是用來治療女性貧血,消費者在選擇購買時一定要認真看好說明書,根據(jù)不同情況進行選擇.葉酸維生素B復(fù)合體之一,相當(dāng)于蝶酰谷氨酸,是米切爾從菠菜葉中提取純化的,故而命名為葉酸.有促進骨髓中幼細胞成熟的作用,人類如缺乏葉酸可引起巨紅細胞性貧血以及白細胞減少癥,對孕婦尤其重要.
葉酸富含于新鮮的水果.蔬菜.肉類食品中.食物中的葉酸若經(jīng)長時間烹煮,可損失50%至90%.天然葉酸廣泛存在于動植物類食品中,尤以酵母.肝及綠葉蔬菜中含量比較多.含葉酸的食物很多,但由于天然的葉酸極不穩(wěn)定,易受陽光.加熱的影響而發(fā)生氧化,所以人體真正能從食物中獲得的葉酸并不多.葉酸生物利用度較低,在45%左右.合成的葉酸在數(shù)月或數(shù)年內(nèi)可保持穩(wěn)定,容易吸收且人體利用度高,約高出天然制品的一倍左右.
2.食品中葉酸的測定
①原理：葉酸是鼠李糖乳桿菌生長所必需的營養(yǎng)素,在一定控制條件下,將鼠李糖乳桿菌液接種至含有試樣液的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)一段時間后測定透光率（或吸光度值）,根據(jù)葉酸含量與透光率（或吸光度值）的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出試樣中葉酸的含量.
②涉及培養(yǎng)基種類
12406菌種儲備用瓊脂培養(yǎng)基
12305-1/12316-1葉酸測定用培養(yǎng)基
③培養(yǎng)基涉及流程詳解
儲備菌種的制備
將菌種鼠李糖乳桿菌轉(zhuǎn)接至瓊脂培養(yǎng)基中,在37±1攝氏度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20至24h,連續(xù)傳種2至3代.取出后放入2至4攝氏度冰箱作為儲備菌株保存.每月至少傳代1次,可傳30代.
實驗前將儲備菌株接種至瓊脂培養(yǎng)基中,在37±1攝氏度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20至24h以活化菌株,用于接種液的制備.
注:保存數(shù)周以上的儲備菌株,不能立即用作接種液制備,試驗前宜連續(xù)傳種2代至3代以保證細菌活力.
接種液的制備
試驗前一天,取2毫升葉酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和4毫升葉酸測定用培養(yǎng)液混勻,分裝于2支5毫升離心管中,塞好棉塞,于121攝氏度高壓滅菌15分鐘后即為種子培養(yǎng)液.冷卻后用接種環(huán)將活化的菌株轉(zhuǎn)種至2支種子培養(yǎng)液中,于37攝氏度±1攝氏度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h至24h.取出后將種子培養(yǎng)液混懸,無菌操作下用無菌注射器吸取0.5毫升轉(zhuǎn)種至另兩支已消毒但不含葉酸的培養(yǎng)液中,于37攝氏度±1攝氏度再培養(yǎng)3h,振蕩混勻,制成接種液,立即使用.
