細(xì)菌的亞硝酸還原實(shí)驗(yàn)
發(fā)布時(shí)間：
2022-12-27
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細(xì)菌的亞硝酸還原實(shí)驗(yàn)
硝酸鹽還原試驗(yàn)原理:
硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過程:一是在合成過程中,硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨,再由氨轉(zhuǎn)化為氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其他含氮化合物;二是在分解代謝過程中,硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體.能使硝酸鹽還原的細(xì)菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產(chǎn)物.但硝酸鹽還原的過程因細(xì)菌不同而異,有的細(xì)菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,如大腸埃希菌;有的細(xì)菌則可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨;有的細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮,如假單胞菌等.硝酸鹽還原試驗(yàn)系測定還原過程中所產(chǎn)生的亞硝酸鹽.
培養(yǎng)基:硝酸鹽培養(yǎng)基.
試劑:甲液(對氨基苯磺酸0.8g+5mol／L醋酸100毫升;乙液(α-奈胺0.5g + 5mol/L醋酸100毫升).
方法:被檢菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基中,于35培養(yǎng)1～4d.將甲、乙液等量混合后(約0.1毫升)加入培養(yǎng)基內(nèi),立即觀察結(jié)果.
結(jié)果:出現(xiàn)紅色為陽性.若加入試劑后無顏色反應(yīng),可能是:硝酸鹽沒有被還原,試驗(yàn)陰性;硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產(chǎn)物而導(dǎo)致假陰性結(jié)果,這時(shí)應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉,如出現(xiàn)紅色則表明試驗(yàn)確實(shí)為陰性.若仍不產(chǎn)生紅色,表示試驗(yàn)為假陰性.若要檢查是否有氮?dú)猱a(chǎn)生,可在培養(yǎng)基管內(nèi)加一小醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理倒管,如有氣泡產(chǎn)生,表示有氮?dú)馍?
應(yīng)用:本試驗(yàn)在細(xì)菌鑒定中廣泛應(yīng)用.腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽;銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌等假單胞菌可產(chǎn)生氮?dú)?有些厭氧菌如韋榮球菌等試驗(yàn)也為陽性.