肉毒梭菌及肉毒毒素檢驗(yàn)
發(fā)布時(shí)間：
2022-12-27
作者：
GB/T4789.12—2016食品微生物學(xué)檢驗(yàn)
肉毒梭菌及肉毒毒素檢驗(yàn)
梭狀芽孢桿菌的生物學(xué)特性
1、形態(tài)與染色肉毒梭菌屬于厭氧性梭狀芽胞桿菌屬,革蘭氏染色陽(yáng)性(老齡菌是陰性）
約為4×1μm的大桿菌,多單在,偶見(jiàn)成雙或短鏈,兩側(cè)平行,兩端鈍園,直桿狀或稍彎曲芽胞為卵圓形,
大于菌體寬度,位于次極端,使菌體呈匙形或網(wǎng)球拍狀,偶有位于中央常見(jiàn)很多游離芽胞.有4~8根周生鞭毛,運(yùn)動(dòng)遲緩,無(wú)莢膜.
2、培養(yǎng)特性最嚴(yán)格的厭氧菌生長(zhǎng)最適溫度：28攝氏度至37攝氏度：pH為6.8~7.6,產(chǎn)毒的最適pH為7.8至8.2.
產(chǎn)毒培養(yǎng)溫度：不同菌型產(chǎn)毒的最適培養(yǎng)溫度不完全相同。
C、D型溫度高些為宜,35攝氏度培養(yǎng)3d即可,而E型菌低溫度長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)效果較好.
對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高：在普通培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng).肉毒梭狀芽孢桿菌菌落在固體培養(yǎng)基表面上,形成類(lèi)圓形,邊緣不整齊,約3毫米左右的菌落。
菌落半透明,表面一般比較光滑也有的呈顆粒狀,界線不明顯,向外擴(kuò)散。呈絨毛網(wǎng)狀,常常擴(kuò)散成菌苔。
在含有肉渣的液體或者半流動(dòng)培養(yǎng)基中,肉毒梭菌生長(zhǎng)旺盛且產(chǎn)生大量氣體,A、B、F三型表面渾濁,底部有粉狀和顆粒狀沉淀,并能消化肉塊,變黑有臭味;而C、D、E三型表明清亮,絮片狀生長(zhǎng),粘貼于管壁.
肉毒梭狀芽孢桿菌菌落在葡萄糖鮮血瓊脂平板上,菌落較小,扁平,顆粒狀。
中央低落,邊緣不規(guī)則,有的菌落還有大的溶血環(huán).在卵黃瓊脂平板上生長(zhǎng),菌落及其培養(yǎng)基周?chē)砻娓采w著特有的彩虹樣薄層,但G型沒(méi)有.
肉毒梭菌的生化性狀很不規(guī)律,即使同型,也常見(jiàn)到株間的差異。
需要用到的培養(yǎng)基列表如下：
50102 采樣袋/均質(zhì)袋
11001 庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)
11002 庖肉牛肉粒
31005 庖肉培養(yǎng)基
11020 胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯（TPGYT 基礎(chǔ)）
51002 胰蛋白酶
11021 厭氧卵黃瓊脂基礎(chǔ)
21001 50%卵黃鹽水懸液
20201 革蘭氏染色液
11022 明膠磷酸鹽緩沖液