綠膿桿菌及培養(yǎng)基的制備
發(fā)布時(shí)間:
2022-12-27
作者:
綠膿桿菌隸屬于假單胞菌屬,與人類的外耳炎和其他傳染病有關(guān).常由帶菌者傳播于水中,如港灣水、河水、池水,尤其是游泳場(chǎng)(池)及浴池,常因管理或消毒不當(dāng)而在其水中含有這種致病菌.
培養(yǎng)基制備
天門(mén)冬增菌肉湯:
天冬酰胺2克,無(wú)水K2HPO4 1克,無(wú)水KH2PO4 10克,MgSO4·7H2O 0.5克,甘油8 毫升,蒸餾水1000毫升pH 6.9-7.2
乙酰胺肉湯:
乙酰胺10克,NaCl 5克,K2HPO4 1.39克,KH2PO4 0.73克,酚紅0.012克,蒸餾水1000毫升,pH 6.9-7.2
Tech 培養(yǎng)基:
蛋白胨20克,MgCl2 1.4克,K2SO4 10克,十六烷基三甲基溴化銨0.5克,甘油10 毫升,蒸餾水1000毫升
增菌培養(yǎng)
取5-10 毫升水樣接種在雙倍濃度的天門(mén)冬增菌肉湯,于35±0.5下培養(yǎng)48小時(shí),若產(chǎn)生綠色或藍(lán)色色素和帶渾濁或渾濁者,可初步認(rèn)為有綠膿桿菌的增殖.
確定試驗(yàn)
取上述增菌培養(yǎng)液1 接種環(huán),移種在乙酰胺肉湯中,于35±0.5下培養(yǎng)48小時(shí),若有紫色產(chǎn)生,表示水樣中確定存在著綠膿桿菌.
分離
應(yīng)用超濾膜法,將濾膜放于Tech 培養(yǎng)基上,置于35±0.5培養(yǎng)24-48小時(shí).典型菌落帶有可溶性.能擴(kuò)散的半透明的藍(lán)色或綠藍(lán)色色素,純化后可供鑒定用.
其樣品中的數(shù)量檢查除在濾膜上計(jì)算菌落外,還可用MPN法.