鑒別生理生化培養(yǎng)基（一）
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
即用型培養(yǎng)皿
鑒別生理生化培養(yǎng)基
EMB培養(yǎng)基
腸道桿菌培養(yǎng)基(伊紅美蘭瓊脂)
成份:蛋白胨10克 乳糖10克 氯化鈉5克 瓊脂25(22)克 水1000毫升
2%伊紅溶液20毫升0.5%美蘭溶液20毫升
制法:將蛋白胨,氯化鈉瓊脂稱好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4過濾,補足失水,加入2%伊紅溶液20毫升,0.5%美蘭溶液20毫升,(115攝氏度高壓20分鐘),冷卻至50攝氏度左右傾注平板,凝固后存冰箱備用.(高壓以后方可再加乳糖)
用途:用作分離沙門氏,志賀氏菌屬,也作菌群調(diào)查.
膽鹽中性紅瓊脂
成份:蛋白胨瓊脂PH7.2-7.45000毫升膽鹽2.5克 乳糖5.0克 對氨基苯甲酸25毫克 1%中性紅溶液25毫升
制法:
將膽鹽,對氨基苯甲酸,乳糖趁熱加入已滅菌之蛋白胨瓊脂中,待冷至50-60攝氏度時,加入1%中性紅液2.5毫升,混合后即傾注平皿,凝固待用.
*:1%中性紅:1克 中性紅加酒精60毫升,加水40毫升
麥康凱培養(yǎng)基
成份:
蛋白胨20克 氯化鈉5克 乳糖10克 瓊脂20克 水1000毫升1%中性紅溶液3--4毫升 1%結(jié)晶紫0.1毫升PH7.4除中性紅臨時用時加入外,其余均高壓滅菌備用.
鄰硝基酚半乳糖甙(ONPG)酶試驗
緩沖液:
Na2H2PO46.9克 溶于40DW中,用5NNOH調(diào)PH7.0,再加水到50毫升,冰箱保存.用前若有結(jié)晶可稍加溫,溶解后再用.
ONPG液:
稱取ONPG(鄰硝基酚--B--D半乳糖苷)80毫克 ,溶于15毫升D.W中,再加上緩沖液5毫升,放入冰箱中保存.此液不穩(wěn)定,如出現(xiàn)黃色即不能用.
鑒別:腦膜炎球菌和乳糖球菌及沙門氏菌屬與枸櫞酸菌屬及亞利桑那氏菌屬.腦膜炎球菌和沙門氏菌屬為陽性.乳球菌,枸櫞酸菌屬和亞利桑那菌屬為陽性.
尿素培養(yǎng)基
成份:蛋白胨0.1克 氯化鈉0.5克 磷酸二氫鉀0.2克 尿素0.2克 (或10%2毫升) 葡萄糖0.01克 (或10%葡萄糖0.1毫升)水100毫升酚紅(0.2%)0.4毫升
制法:除葡萄糖,尿素外把其它藥品稱好放入水中煮沸,使溶解,調(diào)PH7.2過濾,15磅高壓滅菌15分鐘.
配制尿素(滅菌)液:每100毫升基液內(nèi)加2毫升.配制10%葡萄糖(滅菌)每100毫升加0.1毫升.分裝小試管待用.
標準:
滅菌試驗合格.
接種變形桿菌24小時呈紅色.
用途:鑒定變形桿菌用.
葡萄糖蛋白胨水(MRVP用)
成份:蛋白胨5克 葡萄糖5克 K2HPO45克 水1000毫升
制法:將上述稱好溶解分裝試管,調(diào)PH7.4高壓滅菌115攝氏度滅菌20分鐘,或者葡萄糖加熱煮沸后再倒試管
標準:滅菌試驗合格.
接種大腸桿菌VP陰性,M陽性；接種產(chǎn)氣桿菌VP陽性,M陰性.
用途:作鑒別腸道桿菌用.
丙二酸鹽培養(yǎng)基(縮蘋果酸鈉)
成份:丙二酸鈉0.3克 酵母浸膏0.1克 Nacl0.2克 硫酸銨0.2克 K2HPO40.06克 KH2PO40.04克 水100毫升PH6.8,高壓滅菌備用.0.2%溴麝香酚蘭乙醇1.25毫升
制法:與枸椽酸鹽利用試驗相類似,是測定細菌能否利用丙二酸鹽與碳源.無機銨鹽為氨源而生長,生長者使培養(yǎng)基變成堿呈蘭色.
鑒定:克 氏桿菌(+)赫夫尼亞(+)
沙門氏菌(—)痢疾桿菌(—)
苯丙氨酸培養(yǎng)基
成份:酵母浸液1.5克 DL--苯丙氨酸1克 磷酸氫二鈉(無水)0.5克 (或L-苯丙氨酸0.5克 ) 氯化鈉2.5克 瓊脂6克 水500毫升PH7.4
制法:將上述成份加熱溶解,分裝于12*125mm口徑的試管中,每管約4毫升.
高壓滅菌15磅10分鐘,趁熱使試管斜置凝固后備用.
接種時劃斜面.
用途:鑒定沙門氏菌用.苯丙氨酸脫氨酶試驗沙門氏菌陰性.
雙抗培養(yǎng)基
成份:
蛋白胨10克 牛肉膏5克 氯化鈉5克 無水亞硫酸鈉3克 檸檬酸鈉10克 蔗糖10克
瓊脂粉20克 水1000毫升
制法:
將上物稱好,加熱溶于水中.
調(diào)PH8.2—8.4
分裝高壓滅菌后備用.
傾注平板前先加熱溶解瓊脂等冷至50攝氏度左右,按無菌操作加入多、慶抗菌素充分搖勻,傾注平板,凝固后備用.
(慶大霉素:150u/毫升,多粘菌素:1500u/毫升,2毫升加至1000毫升培養(yǎng)基內(nèi),此相當于慶大霉素0.3u/毫升,多粘菌素3u/毫升)
青島日水生物摘