培養(yǎng)皿的無菌檢測有哪些具體方法？
發(fā)布時間：
2024-09-02
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培養(yǎng)皿的無菌檢測有哪些具體方法？
一、直接培養(yǎng)法
1.準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備適宜的無菌培養(yǎng)基，如營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基等，根據(jù)檢測的微生物類型選擇合適的培養(yǎng)基。
確保操作環(huán)境為無菌環(huán)境，如在超凈工作臺中進行操作。
2.操作步驟
將待檢測的培養(yǎng)皿蓋打開，倒扣在無菌培養(yǎng)基上，輕輕按壓，使培養(yǎng)皿底部與培養(yǎng)基充分接觸。
將接種好的培養(yǎng)基平板置于適宜的溫度下培養(yǎng)，一般細(xì)菌培養(yǎng)溫度為30-37℃，培養(yǎng)時間為24-48小時；真菌培養(yǎng)溫度為25-28℃，培養(yǎng)時間為3-5天。
觀察培養(yǎng)基平板上是否有菌落生長。如果沒有菌落生長，則說明無菌；如果有菌落生長，則說明存在污染。
二、薄膜過濾法
1.準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備無菌濾膜（一般為0.45微米或0.22微米孔徑）、過濾器、無菌注射器等。
選擇適宜的沖洗液和培養(yǎng)基，沖洗液用于沖洗培養(yǎng)皿，將可能存在的微生物沖洗下來，培養(yǎng)基用于檢測沖洗液中的微生物。
2.操作步驟
將待檢測的培養(yǎng)皿用適量的沖洗液沖洗，使沖洗液流過表面，收集沖洗液。
將收集到的沖洗液通過無菌濾膜過濾，將微生物截留在濾膜上。
將濾膜轉(zhuǎn)移到無菌培養(yǎng)基平板上，使濾膜正面朝上，與培養(yǎng)基充分接觸。
將接種好的培養(yǎng)基平板置于適宜的溫度下培養(yǎng)，觀察是否有菌落生長。
三、肉湯培養(yǎng)法
1.準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備無菌的肉湯培養(yǎng)基，如硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基、胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基等。
確保操作環(huán)境為無菌環(huán)境。
2.操作步驟
將待檢測的板皿放入無菌容器中，加入適量的無菌肉湯培養(yǎng)基，使培養(yǎng)皿完全浸沒在肉湯中。
將容器密封，置于適宜的溫度下培養(yǎng)，一般細(xì)菌培養(yǎng)溫度為30-37℃，培養(yǎng)時間為24-48小時；真菌培養(yǎng)溫度為25-28℃，培養(yǎng)時間為3-5天。
觀察肉湯培養(yǎng)基是否變渾濁或出現(xiàn)沉淀。如果肉湯培養(yǎng)基保持澄清，則說明平板無菌；如果肉湯培養(yǎng)基變渾濁或出現(xiàn)沉淀，則說明培養(yǎng)皿存在污染。
四、顯色培養(yǎng)基法
1.準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備特定的顯色培養(yǎng)基，不同的顯色培養(yǎng)基可用于檢測不同類型的微生物。
確保操作環(huán)境為無菌環(huán)境。
2.操作步驟
將待檢測的培養(yǎng)皿蓋打開，倒扣在顯色培養(yǎng)基上，輕輕按壓，使皿底部與培養(yǎng)基充分接觸。
將接種好的培養(yǎng)基平板置于適宜的溫度下培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基上是否出現(xiàn)特定的顏色變化或菌落特征。不同的顯色培養(yǎng)基會根據(jù)檢測的微生物類型顯示不同的顏色或特征，如檢測大腸桿菌的顯色培養(yǎng)基會使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)特定的顏色，從而判斷培養(yǎng)皿是否存在相應(yīng)的污染。