簡(jiǎn)述配制好的培養(yǎng)基要達(dá)到哪些要求
發(fā)布時(shí)間：
2022-11-16
作者：
日水生物
簡(jiǎn)述配制好的培養(yǎng)基要達(dá)到哪些要求
營(yíng)養(yǎng)均衡：六大營(yíng)養(yǎng)物缺一不可。部分生物還有特殊的要求；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的配比；酸堿度。
培養(yǎng)基必須含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學(xué)藥品必須純凈，稱取的份量務(wù)必準(zhǔn)確。酸堿度應(yīng)符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求。按各種培養(yǎng)基要求準(zhǔn)確測(cè)定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)的適宜pH值為7.2～7.6，呈弱堿性。
培養(yǎng)基配制時(shí)的質(zhì)量控制
容器：配制和分裝培養(yǎng)基的燒瓶，平皿或試管等器材應(yīng)為中性，無(wú)酸，堿。
成分來(lái)源：各種成分來(lái)源可靠，不含對(duì)目的菌生長(zhǎng)有抑制的物質(zhì)。特殊要o/f試驗(yàn)），除加入葡萄糖外，不能含o/f試驗(yàn)的假陽(yáng)性。培養(yǎng)基配制用。
pH值調(diào)整：根據(jù)培養(yǎng)基的不同要求調(diào)整pH 值，控制在要求范圍的±0.2應(yīng)當(dāng)注意，培養(yǎng)基在高壓滅菌后其pH 值降低0.1～0.2，故矯正時(shí)應(yīng)比實(shí)p H值高0.1～0.2。
滅菌：根據(jù)培養(yǎng)基所含成分及配制數(shù)量的不同，選擇不同的滅菌方式，既MH瓊脂，營(yíng)121℃15min ；而含糖的培養(yǎng)基則以108℃滅菌為好。
分裝：根據(jù)使用的目的和要求決定分裝量。分裝培養(yǎng)基所用的平皿，試管要求清潔，不殘留酸堿；制備平板培養(yǎng)基時(shí)，操作臺(tái)要水平，以避免瓊脂平板厚薄不一，同時(shí)確保無(wú)菌操作。
培養(yǎng)基配制后的質(zhì)量控制
培養(yǎng)基外觀情況：包括顏色，透明度，有無(wú)沉淀和凝固。如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面有裂紋或與培養(yǎng)皿的邊緣分離，說(shuō)明培養(yǎng)基有脫水現(xiàn)象，必須丟棄。
無(wú)菌試驗(yàn)：每一批配好的培養(yǎng)基均須進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)。先滅菌后分裝的培養(yǎng)基，可采用抽樣方法試驗(yàn)，少于100個(gè)樣本通常選取5％～10％的量，如果配制大量培養(yǎng)基，則任意選取10 個(gè)培養(yǎng)基；無(wú)菌分裝培養(yǎng)基則需全部做無(wú)菌試驗(yàn)。樣本在35攝氏度或其他適宜的溫度下隔夜培養(yǎng)，如培養(yǎng)基含有血液，則需再置于室溫1天，以檢查嗜冷菌。選擇性培養(yǎng)基因含有抑制物質(zhì)，能抑制許多微生物，因此，可加入10倍量的無(wú)菌液體培養(yǎng)基，稀釋抑制物質(zhì)，以利于檢出污染菌。即使做過(guò)無(wú)菌試驗(yàn)，接種時(shí)，也要檢查每個(gè)平板上的可見菌落。
性能測(cè)試：每一批新制或新購(gòu)的培養(yǎng)基，使用前均須取已知性質(zhì)的庫(kù)存菌種進(jìn)行性能測(cè)試。培養(yǎng)基按目的不同可分為增菌培養(yǎng)基，分離培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。
增菌培養(yǎng)基：接種少量難以生長(zhǎng)的細(xì)菌，在一定時(shí)間內(nèi)觀察增菌情況，細(xì)菌能生長(zhǎng)的最小接種濃度越小，說(shuō)明增菌培養(yǎng)基性能愈好。
分離培養(yǎng)基：要求目的菌生長(zhǎng)良好，非目的菌被抑制。一般要求生長(zhǎng)的目的菌接種量不可過(guò)多，較好的方法是將測(cè)試菌調(diào)成0．5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙?，再?.001ml的標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)涂劃在培養(yǎng)基上，觀察菌落生長(zhǎng)。
鑒定培養(yǎng)基：應(yīng)選擇具有典型特征的菌株作性能試驗(yàn)。如三糖鐵瓊脂，須用弗勞地枸櫞酸桿菌，福氏志賀菌及銅綠假單胞菌3種菌分別接種3支培養(yǎng)基，若反應(yīng)結(jié)果為斜面產(chǎn)酸／高層產(chǎn)酸，硫化氫陽(yáng)性，斜面產(chǎn)堿／高層產(chǎn)酸，斜面產(chǎn)堿／高層產(chǎn)堿，質(zhì)量才算合格。
來(lái)自：青島日水生物qdrishui.cn