致瀉大腸埃希氏菌套裝生化鑒定管7種
發(fā)布時間：
2022-11-16
作者：
企業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基
致瀉大腸埃希氏菌套裝生化鑒定管7種（GB 4789）
包含蛋白胨水、半固體瓊脂、氰化鉀、氰化鉀對照、賴氨酸、氨基酸對照、尿素瓊脂、氧化酶、液體石蠟
1.氰化鉀試驗
原理:氰化鉀是細菌呼吸酶系統(tǒng)的抑制劑,可與呼吸酶作用使酶失去活性,抑制細菌的生長,但有的細菌在一定濃度的氰化鉀存在時仍能生長,以此鑒別細菌.
試驗方法:取培養(yǎng)18～24h的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液或菌落1環(huán)，接種至對照培養(yǎng)基及氰化鉀培養(yǎng)基內(nèi)，立即以橡膠塞塞緊，36±1 ℃培養(yǎng)24～ 48h，觀察結(jié)果。
結(jié)果記錄:對照管有菌生長，試驗管有菌生長為陽性。對照管有菌生長，試驗管無菌生長為陰性。
2.尿素酶實驗
原理：有些細菌能產(chǎn)生尿素酶，將尿素分解、產(chǎn)生2個分子的氨，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，酚紅呈粉紅色。尿素酶是誘導(dǎo)酶，因為不論底物尿素是否存在，細菌均能合成此酶。其活性最適pH為7.0。
試驗方法：挑取18~24h待試菌培養(yǎng)物穿刺并涂布于瓊脂斜面，不要到達底部，留底部作變色對照。30~35℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。變?yōu)榉奂t色為陽性。
3.三糖鐵(TSI)瓊脂斜面
本培養(yǎng)基適合于腸桿菌科的鑒定。用于觀察細菌對糖的利用和硫化氫（變黑）的產(chǎn)生。
原理：該培養(yǎng)基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1，只能利用葡萄糖的細菌，葡萄糖被分解產(chǎn)酸可使斜面變黃，但因量少，生成的少量酸，因接觸空氣而氧化，加之細菌利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì)，生成堿性產(chǎn)物，故使斜面后來又變紅，底部由于是在厭氧狀態(tài)下，酸類不被氧化，所以仍保持黃色。而發(fā)酵乳糖的細菌，則產(chǎn)生大量的酸，使整個培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。如培養(yǎng)基接種后產(chǎn)生黑色沉淀，是因為某些細菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng)，生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
試驗方法：挑取18~24h待試菌培養(yǎng)物穿刺并涂布于瓊脂斜面，30~35℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。
44102：斜面呈黃色，底部培養(yǎng)基破裂
福氏志賀氏菌：底部黃色，斜面呈紅色
鼠傷寒沙門氏菌：斜面呈黑色，底部培養(yǎng)基破裂
4.MUG試驗
原理：菌的葡萄糖醛酸苷酶在堿性條件下，作用于4－甲基傘形酮－β－D葡萄糖醛酸苷（4－Methylumbellifery－β－D－Glucuronide簡稱MUG）的β糖醛酸苷鍵，使其水解，釋放的4－甲基傘形酮在366nm紫外燈下產(chǎn)生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。試驗方法：挑取18~24h待試菌培養(yǎng)物穿刺并涂布于瓊脂斜面，30~35℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。