沙門氏菌檢驗(yàn)注意事項(xiàng):生化鑒定三糖鐵瓊脂

發(fā)布時間：

2022-12-27

作者：

山東培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家

檢驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng):生化鑒定三糖鐵瓊脂

三糖鐵瓊脂

反應(yīng)原理：

蛋白胨、牛肉粉、酵母粉和?胨提供氮源、維生素、礦物質(zhì)；乳糖、葡萄糖、蔗糖為可發(fā)酵糖類，其產(chǎn)酸時通過酚紅指示劑測出，酸性呈黃色，堿性呈紅色；硫代硫酸鈉可被某些細(xì)菌還原為硫化氫，與硫酸亞鐵中的鐵鹽生成黑色硫化鐵；糖發(fā)酵有氣體產(chǎn)生，且指示劑由紅變黃，本產(chǎn)品葡萄糖、乳糖和蔗糖比例為1:10:10；發(fā)酵葡萄糖的試管底部變黃，斜面產(chǎn)生的少量的酸因被空氣中的氧迅速氧化，從而導(dǎo)致斜面保持紅色或恢復(fù)到堿性pH，在有限的葡萄糖耗盡后，微生物如果可利用乳糖或蔗糖，則斜面因糖發(fā)酵產(chǎn)酸而變黃；氯化鈉維持均衡的滲透壓；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

質(zhì)控菌株和反應(yīng)現(xiàn)象

a:腸炎沙門氏菌，生長良好，K/A、H2S+、產(chǎn)氣

b:大腸埃希氏菌，生長良好，A/A、H2S-、產(chǎn)氣

c:普通變形桿菌，生長良好，A/A、H2S+、產(chǎn)氣

d:福氏志賀氏菌，生長良好，K/A、H2S-、不產(chǎn)氣

e:銅綠假單胞菌，生長良好，K/K、H2S-、不產(chǎn)氣

f:空白對照

尿素瓊脂（pH7.2）

反應(yīng)原理：

KH2PO4作為緩沖劑中和細(xì)菌代謝蛋白胨產(chǎn)生的堿，腸桿菌利用葡萄糖產(chǎn)酸，也會中和其代謝蛋白胨產(chǎn)生的堿，同時可以激發(fā)尿素酶活性，酚紅為酸堿指示劑。某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶水解尿素，生成堿性碳酸銨，從而使培養(yǎng)基由橙紅色變成粉紅色。

質(zhì)控菌株名稱生和化反應(yīng)結(jié)果

大腸埃希氏菌(左二)陰性:培養(yǎng)基變黃

奇異變形桿菌(中)陽性:培養(yǎng)基變粉紅色

肺炎克雷伯氏菌(右二)弱陽性:斜面處變粉

鼠傷寒沙門氏菌(右一)陰性:培養(yǎng)基變黃

氰化鉀培養(yǎng)基

原理：某些細(xì)菌的呼吸鏈酶系統(tǒng)可被一定濃度（0.1‰）的氰化鉀抑制而導(dǎo)致細(xì)菌不能生長。還有某些細(xì)菌不被氰化鉀抑制，所以在有氰化鉀存在的情況下仍能生長，可以以此鑒別細(xì)菌。

注意事項(xiàng)：1、一株待檢菌需同時接種氰化鉀試驗(yàn)管和氰化鉀對照管各一支。2、兩管均需滴加無菌液體石蠟覆蓋液面，因?yàn)榍杌浺追纸?，產(chǎn)生氫氰酸，易揮發(fā)，影響試劑濃度。

質(zhì)控菌株名稱、菌號、試驗(yàn)管/對照管和結(jié)果判定

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC 13311

抑制/生長