大腸桿菌IMVC生化鑒定套裝(GB、SN)
發(fā)布時間：
2022-12-24
作者：
成品培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)
大腸桿菌IMVC生化鑒定套裝(GB、SN)
(含2支緩沖蛋白胨水、1支蛋白胨水、1支Korser氏檸檬酸鹽肉湯)
用來測定菌的生理生化特征的4個實驗:
I吲哚試驗
M:甲基紅試驗
V:V.P試驗
C:檸檬酸實驗
1.吲哚試驗:原理：一些細(xì)菌(如大腸埃希菌、變形桿菌、霍亂弧菌等)能分解培養(yǎng)基中的色氨酸生成吲哚(靛基質(zhì)),經(jīng)與試劑中的對二甲基氨基苯甲醛作用,生成玫瑰吲哚而呈紅色,則為吲哚試驗陽性.
2.方法：將試驗菌用蛋白胨水培養(yǎng)基30~35℃培養(yǎng)24小時滴加吲哚試劑2~4滴呈玫瑰紅的為陽性不變色的為陰性.
3.MR-VP試驗包括甲基紅試驗和VP試驗.
A.甲基紅試驗
原理:一些細(xì)菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步代謝分解為乳酸、甲酸、乙酸,使培養(yǎng)基的pH下降到4.5以下,加入甲基紅指示劑即顯紅色(甲基紅變紅的范
VP(Voges-Proskaurer)試驗
原理:某些細(xì)菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,并進(jìn)一步將丙酮酸脫羧成為乙酰甲基甲醇,后者在堿性環(huán)境中被空氣中的氧氧化成為二乙酰,進(jìn)而與培養(yǎng)基中的精氨酸等所含的胍基結(jié)合,形成紅色的化合物,即VP試驗陽性.
方法:將待檢菌接種至葡萄糖蛋白臟水培養(yǎng)基中,30~35℃培養(yǎng)24h,加入VP試劑甲液6滴-乙液2滴,混勻后30~35℃培養(yǎng)30min,觀察結(jié)果紅色者為陽性,陰性結(jié)果常呈灰色、白色或無色.有些細(xì)菌可能會出現(xiàn)反應(yīng)遲緩的情況,滴加試劑后若為陰性,應(yīng)于培養(yǎng)中繼續(xù)培養(yǎng)4小時,4小時內(nèi)未變紅者判為陰性.
4.檸檬酸實驗
原理：有的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌,能利用檸檬酸鈉為碳源,因此能在檸檬酸鹽培養(yǎng)基上生長,并分解檸檬酸鹽后產(chǎn)生碳酸鹽,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性.此時培養(yǎng)基中的溴麝香草酚藍(lán)指示劑由綠色變?yōu)樯钏{(lán)色.不能利用檸檬酸鹽為碳源的細(xì)菌,在該培養(yǎng)基上不生長,培養(yǎng)基不變色.方法：將試驗菌培養(yǎng)在檸檬酸鹽培養(yǎng)基斜面上37℃培養(yǎng)24h觀察有無細(xì)菌生長與培養(yǎng)基顏色變化如果含有溴麝香草酚藍(lán)的斜面藍(lán)色者為陽性,反應(yīng)呈綠色的為陰性,反應(yīng)含苯酚紅的斜面如果呈紅色為陽性,反應(yīng)呈黃色為陰性反應(yīng).