傷寒Vi多糖疫苗的制造和檢定
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
商品預(yù)制化培養(yǎng)基
傷寒Vi多糖疫苗的制造和檢定
本品系用傷寒沙門菌培養(yǎng)液純化的Vi多糖,經(jīng)用PBS稀釋制成.用于預(yù)防傷寒.
種子批的檢定
培養(yǎng)特性
菌種接種于pH7.2至7.4的肉湯瓊脂、馬丁瓊脂或其他適宜的培養(yǎng)基35至37攝氏度培養(yǎng)16至20小時,應(yīng)為無色半透明、邊緣整齊、表面光滑濕潤的圓形菌落.
染色鏡檢應(yīng)為革蘭氏陰性桿菌.
生化反應(yīng)
發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、甘露醇均產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;不發(fā)酵乳糖、蔗糖(通則3605);氧化酶試驗(yàn)陰性.
原液生產(chǎn)用種子.
啟開工作種子批菌種,檢定培養(yǎng)特性及染色鏡檢合格后,接種于改良半綜合培養(yǎng)基或其他適宜培養(yǎng)基,制備數(shù)量適宜的生產(chǎn)用種子.
生產(chǎn) 用培養(yǎng)基
采用改良半綜合培養(yǎng)基或經(jīng)批準(zhǔn)的其他培養(yǎng)基.培養(yǎng)基不應(yīng)含有與十六烷基三甲基溴化銨能形成沉淀的成分.
培養(yǎng)
采用培養(yǎng)罐液體培養(yǎng).在培養(yǎng)過程中及殺菌前取樣進(jìn)行菌液濃度測定及純菌檢查,涂片做革蘭氏染色鏡檢,如發(fā)現(xiàn)污染雜菌,應(yīng)廢棄.
收獲及殺菌.
培養(yǎng)物于對數(shù)生長期的后期或靜止期的前期收獲.取樣進(jìn)行菌液濃度測定及純菌檢查,合格后在收獲的培養(yǎng)液中加入甲醛溶液殺菌,殺菌條件以確保殺菌完全又不損傷其多糖抗原為宜.
純化 去核酸
將已殺菌的培養(yǎng)液離心后收集上清液,加入十六烷基三.甲基溴化銨,充分混勻,形成沉淀;離心后的沉淀物用注射用水溶解,并加入適量氯化鈉(或氯化鈣)溶液,使多糖與十六烷基三甲基溴化銨解離;加入乙醇至最終濃度為25%,2至8攝氏度靜置1至3小時或過夜,離心收集澄清的上清液.