傷寒疫苗的檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間：

2022-12-27

作者：

商品化的成品培養(yǎng)基那家好

傷寒疫苗

免疫力試驗(yàn)

將經(jīng)56攝氏度30分鐘加溫(或用其他方法殺菌)不加防腐劑的菌液稀釋為2.5X10*/毫升.用該菌液免疫體重為14至16g小鼠至少30只,每只皮下注射0. 5毫升,注射2次,間隔7天,末次免疫后9至11天進(jìn)行毒菌攻擊.免疫組小鼠每只腹腔注射0.5毫升含1毫升D的毒菌,同時(shí)應(yīng)用同批飼養(yǎng)或體重與免疫組相同的小鼠3組(每組至少5只)作對(duì)照,分別于腹腔注射2毫升D、1毫升D及1/2毫升D的毒菌(各含于0.5毫升中).觀察3天,對(duì)照組小鼠感染2毫升D及1毫升D者應(yīng)全部死亡,感染1/2毫升D者有部分死亡.免疫組小鼠存活率應(yīng)不低于70%.

免疫力試驗(yàn)也可用LDso攻擊法.將經(jīng)56攝氏度30分鐘加溫(或用其他方法殺菌)不加防腐劑的菌液稀釋為2. 5X108/毫升.用該菌液免疫體重為14至16g小鼠至少30只,每只皮下注射0.5毫升,注射2次,間隔7天,末次免疫后9至11天進(jìn)行毒菌攻擊.用培養(yǎng)12至16小時(shí)的菌苔,以pH7.2至7.4的肉湯培養(yǎng)基或生理氯化鈉溶液稀釋至適當(dāng)濃度,進(jìn)行攻擊.免疫組小鼠應(yīng)感染100LDs0以上的毒菌.同時(shí)應(yīng)用同批飼養(yǎng)或體重與免疫組相同的小鼠3至4組(每組至少5只),分別感染不同劑量毒菌作對(duì)照.免疫組及對(duì)照組分別腹腔注射0.5毫升,觀察3天,計(jì)算LDso.免疫組小鼠存活率應(yīng)不低于70%.

原液

生產(chǎn)用種子

工作種子批檢定合格后方可用于生產(chǎn),將工作種子批菌種接種于改良半綜合培養(yǎng)基或其他適宜培養(yǎng)基,制備生產(chǎn)用種子.

生產(chǎn)用培養(yǎng)基

采用pH7.2至7.4的馬丁瓊脂、肉湯瓊脂或經(jīng)批準(zhǔn)的其他培養(yǎng)基.

菌種接種和培養(yǎng)

采用涂種法接種,接種后置35至37攝氏度培養(yǎng)18至 24小時(shí).

收獲

刮取菌苔混懸于PBS中即為原液.逐瓶做純菌檢查,取樣接種瓊脂斜面2管,分別置35至37攝氏度培養(yǎng)2天,24至26攝氏度培養(yǎng)1天,如有雜菌生長(zhǎng)應(yīng)廢棄.

殺菌

在純菌檢查合格的原液中加入終濃度為1.0%至1.2%的甲醛溶液,置37攝氏度殺菌,時(shí)間不得超過7天,再

保存于2至8攝氏度.