常用培養(yǎng)基配方三 培養(yǎng)基的配置
發(fā)布時(shí)間：
2022-12-27
作者：
一次性成品培養(yǎng)基
45 HE瓊脂
成分:
脙胨 12g
牛肉膏 3g
乳糖 12g
蔗糖 12g
水楊素 2g
膽鹽 20g
氯化鈉 5g
瓊脂 18～20g
蒸餾水 1000mL
0.4%溴麝香草酚藍(lán)溶液 16mL
Andrade指示劑 20mL
甲液 20mL
乙液 20mL
pH7.5
制法:將前面七種成分溶解于400mL蒸餾水內(nèi)作為基礎(chǔ)液;將瓊脂加入于600mL蒸餾水內(nèi),加熱溶解.加入甲液和乙液于基礎(chǔ)液內(nèi),校正pH.再加入指示劑,并與瓊脂液合并,待冷至50～55℃,傾注平板.
注:①此培養(yǎng)基不可高壓滅菌.
②甲液的配制
硫代硫酸鈉 34g
檸檬酸鐵銨 4g
蒸餾水 100mL
②乙液的配制
去氧膽酸鈉 10g
蒸餾水 100mL
②Andrade指示劑
酸性復(fù)紅 0.5g
1mol/L氫氧化鈉溶液 16mL
蒸餾水 100mL
將復(fù)紅溶解于蒸餾水中,加入氫氧化鈉溶液.數(shù)小時(shí)后如復(fù)紅褪色不全,再加氫氧化鈉溶液1～2mL.
46 SS瓊脂
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
牛肉膏 5g
眎胨 5g
三號(hào)膽鹽 3.5g
瓊脂 17g
蒸餾水 1000mL
再將兩液混合,121℃高壓滅菌15min,保存?zhèn)溆?
完全培養(yǎng)基:
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 100mL
乳糖 10g
檸檬酸鈉 8.5g
硫代硫酸鈉 8.5g
10%檸檬酸鐵溶液 10mL
1%中性紅溶液 2.5mL
0.1%煌綠溶液 0.33mL
加熱溶化基礎(chǔ)培養(yǎng)基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均勻,校正至pH7.0,加入中性紅和煌綠溶液,傾注平板.
注:①制好的培養(yǎng)基宜當(dāng)日使用,或保存于冰箱內(nèi)于48h內(nèi)使用.
②煌綠溶液配好后應(yīng)在10d以內(nèi)使用.
③可以購(gòu)用SS瓊脂的干燥培養(yǎng)基.
47 WS瓊脂
成分:
②胨 12g
牛肉膏 3g
氯化鈉 5g
乳糖 12g
蔗糖 12g
十二烷基硫酸鈉 2g
瓊脂 15g
Andrade指示劑 20mL
0.4%溴麝香草酚藍(lán)溶液 16mL
甲液 20mL
蒸餾水 1000mL
pH7.0
制法:除指示劑和甲液外,將其他成分加熱溶解,不需消毒,校正pH后加入指示劑和甲液,傾注平板應(yīng)呈草綠色. 注:①供沙門氏菌分離用.
②Andrade指示劑和甲液的配制均見HE瓊脂.
48 麥康凱瓊脂
成分:
蛋白胨 17g
眎胨 3g
豬膽鹽(或牛,羊膽鹽) 5g
氯化鈉 5g
瓊脂 17g
蒸餾水 1000mL
乳糖 10g
0.01%結(jié)晶紫水溶液 10mL
0.5%中性紅水溶液 5mL
制法:
1 將蛋白胨,眎,膽鹽和氯化鈉溶解于400mL蒸餾水中,校正pH7.2.將瓊脂加入600mL
加熱溶解.將兩液合并,分裝于燒瓶?jī)?nèi),121℃高壓滅菌15min備用.
2 臨用時(shí)加熱溶化瓊脂,趁熱加入乳糖,冷至50～55℃時(shí),加入結(jié)晶紫和中性紅水溶液,搖勻后傾注平板.
注:結(jié)晶紫及中性紅水溶液配好后須經(jīng)高壓滅菌.
49 伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)
成分:
蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氫二鉀 2g
瓊脂 17g
2%伊紅Y溶液 20mL
0.65%美藍(lán)溶液 10mL
蒸餾水 1000mL
pH7.1
制法:將蛋白胨,磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH,分裝于燒瓶?jī)?nèi),121℃高壓滅菌15min備用.臨用時(shí)加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷至50～55℃,加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻,傾注平板.
50三糖鐵瓊脂(TSI)
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 5g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
硫酸亞鐵銨〔Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O〕 0.2g
硫代硫酸鈉 0.2g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH.加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂.加入0.2%酚紅水溶液12.5mL,搖勻.分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層.121℃高壓滅菌15min.放置高層斜面?zhèn)溆?
51 三糖鐵瓊脂(換用方法)
成分:
蛋白胨 15g
眎胨 5g
牛肉膏 3g
酵母膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
硫酸亞鐵 0.2g
硫代硫酸鈉 0.3g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH.加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂.加入0.2%酚紅水溶液12.5mL,搖勻.分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層.121℃高壓滅菌15min,放置高層斜面?zhèn)溆?
52 克氏雙糖鐵瓊脂(KI)
上層培養(yǎng)基成分
血消化湯(pH7.6) 500mL
瓊脂 6.5g
硫代硫酸鈉 0.1g
硫酸亞鐵銨 0.1g
乳糖 5g
0.2%酚紅溶液 5mL
下層培養(yǎng)基成分
血消化湯(pH7.6) 500mL
瓊脂 2g
葡萄糖 1g
0.2%酚紅溶液 5mL
制法:
1 取血消化湯按上層和下層的瓊脂用量,分別加入瓊脂,加熱溶解.
2 分別加入其他各種成分.將上層培養(yǎng)基分裝于燒瓶?jī)?nèi);將下層培養(yǎng)基分裝于滅菌12mm×100mm試管內(nèi),每管約2mL.115℃高壓滅菌10min.
3 將上層培養(yǎng)基放在56℃水浴箱內(nèi)保溫;將下層培養(yǎng)基直立放在室溫內(nèi),使其凝固.
4 當(dāng)下層培養(yǎng)基凝固后,以無菌手續(xù)將上層培養(yǎng)基分裝于下層培養(yǎng)基的上面,每管約1.5mL,放成斜面.
53 克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法)
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 3g
酵母膏 3g
乳糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
檸檬酸鐵銨 0.5g
硫代硫酸鈉 0.5g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH.加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂.加入0.2%酚紅水溶液12.5mL,搖勻.分裝試管,裝量宜多些,以便得到比較高的底層.121℃高壓滅菌15min.放置高層斜面?zhèn)溆?
54 葡萄糖半固體發(fā)酵管
成分:
蛋白胨 1g
牛肉膏 0.3g
氯化鈉 0.5g
1.6%溴甲酚紫酒精溶液 0.1mL
葡萄糖 1g
瓊脂 0.3g
蒸餾水 100mL
pH7.4
制法:將蛋白胨,牛肉膏和氯化鈉加入于水中,校正pH后加入瓊脂加熱溶解,再加入指示劑和葡萄糖,分裝小試管,滅菌121℃ 15 min.
55 5%乳糖發(fā)酵管
成分:
蛋白胨 0.2g
氯化鈉 0.5g
乳糖 5g
2%溴麝香草酚藍(lán)水溶液 1.2mL
蒸餾水 100mL
pH7.4
制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸餾水內(nèi),校正pH.將乳糖溶解于另外50mL蒸餾水內(nèi),分別滅菌121℃ 15min,將兩液混合,以無菌操作分裝于滅菌小試管內(nèi).
注:在此培養(yǎng)基內(nèi),大部分乳糖遲緩發(fā)酵的細(xì)菌可于1d內(nèi)發(fā)酵.
56 CAYE培養(yǎng)基
此培養(yǎng)基附在腸毒素診斷試劑盒內(nèi),如無此培養(yǎng)基,亦可用Honda氏產(chǎn)毒肉湯.
57 Honda氏產(chǎn)毒肉湯
成分:
水解酪蛋白 20g
酵母浸膏粉 10g
氯化鈉 2.5g
磷酸氫二鈉 15g
葡萄糖 5g
微量元素 0.5mL
蒸餾水 1000mL
pH7.5
制法:溶解后校正pH,高壓滅菌121℃ 15min,待冷至45～50℃時(shí),加入林可霉素溶液,每毫升培養(yǎng)基內(nèi)含90μg.
微量元素配方:硫酸鎂 5g,氯化鐵 0.5g,氯化鉆 2g,蒸餾水 100mL
58 Elek氏培養(yǎng)基(毒素測(cè)定用)
成分:
胨 20g
麥芽糖 3g
乳糖 0.7g
氯化鈉 5g
瓊脂 15g
40%氫氧化鈉溶液 1.5mL
蒸餾水 1000mL
pH7.8
制法:用500mL蒸餾水溶解瓊脂以外的成分,煮沸,并用濾紙過濾.用1mo1/L氫氧化鈉校正pH.用另外500mL蒸餾水加熱溶解瓊脂.將兩液混合,分裝試管10mL或20mL.121℃高壓滅菌15min.臨用時(shí)加熱溶化瓊脂傾注平板.
59 氯化鎂孔雀綠羧芐青霉素培養(yǎng)基
成分:
甲液:胰蛋白胨 10g
蒸餾水 1000mL
乙液:磷酸氫二鈉 9.5g
蒸餾水 1000mL
丙液:氯化鎂(MgCl2·6H2O) 40g
蒸餾水 400mL
以上分別在121℃滅菌15min.
丁液:孔雀綠 0.2g
蒸餾水 100mL
戊液:羧芐青霉素 1mg/mL
制法:取甲液620mL,乙液160mL,丙液212mL混合,再加入丁液6.4mL和戊液2.4mL,即為1000mL培養(yǎng)基.分裝滅菌燒瓶,每瓶100mL,或滅菌試管10mL.
60 胰蛋白胨水
成分:
胰蛋白胨 10g
蒸餾水 1000mL
pH7.0
制法:將上述成分溶解,校正pH.分裝試管,121℃高壓滅菌15min.
61 Rustigian氏尿素培養(yǎng)液
成分:
尿素 20.0g
酵母浸膏 0.1g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.091g
磷酸氫二鈉(Na2HPO4) 0.095g
酚紅 0.01g
蒸餾水 1000mL
制法:將上述成分:于蒸餾水中溶解,校正pH為6.8±0.2. 不要加熱,過濾除菌,無菌分裝于滅菌小試管中,每管為約3mL.
用途:尿素酶試驗(yàn)用.
62 氯化鈉結(jié)晶紫增菌液
成分:
蛋白胨 20g
氯化鈉 40g
0.01%結(jié)晶紫溶液 5mL
蒸餾水 1000mL
pH9.0
制法:
除結(jié)晶紫外,其他按上述成分:配好,加熱溶解.約加30%氫氧化鉀溶液4.5mL,校正pH.加熱煮沸,過濾.再加入結(jié)晶紫溶液,混合后分裝試管.121℃高壓滅菌15min.
63 氯化鈉蔗糖瓊脂
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 10g
氯化鈉 50g
蔗糖 10g
瓊脂 18g
0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液 20mL
蒸餾水 1000mL
pH7.8
制法:將牛肉膏,蛋白胨及氯化鈉溶解于蒸餾水中,校正pH.加入瓊脂,加熱溶解,過濾.加入指示劑,分裝燒瓶100mL.121℃高壓滅菌15min備用.臨用前在100mL培養(yǎng)基內(nèi)加入蔗糖1g,加熱溶化并冷至50℃,傾注平板.
64 嗜鹽