一次性培養(yǎng)基無菌檢驗(yàn)方法
發(fā)布時(shí)間：
2025-04-03
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直接接種法
準(zhǔn)備工作：在無菌操作臺(tái)中，將適量的無菌生理鹽水或其他合適的稀釋液加入到待檢的一次性培養(yǎng)基中，輕輕振蕩使其充分溶解或混合。
接種培養(yǎng)：用無菌吸管吸取適量的上述溶液，接種到硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中。一般接種量為1-2ml。然后放入培養(yǎng)箱中，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基在30-35℃培養(yǎng)，胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基在20-25℃培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間通常為14天。
結(jié)果觀察：在培養(yǎng)期間，每天觀察顏色變化、渾濁程度以及有無沉淀等現(xiàn)象。如果保持澄清，且無任何微生物生長的跡象，則判定無菌；若出現(xiàn)渾濁、變色、產(chǎn)生沉淀或有菌膜等現(xiàn)象，則表明被微生物污染，無菌檢驗(yàn)不合格。
薄膜過濾法
過濾操作：取適量的待檢一次性培養(yǎng)基溶液，通過無菌的薄膜過濾器進(jìn)行過濾。一般選擇孔徑為0.45μm或0.22μm的濾膜，以截留可能存在的微生物。
沖洗與接種：過濾完成后，用無菌的沖洗液沖洗濾膜，以去除殘留物質(zhì)，避免對后續(xù)培養(yǎng)產(chǎn)生干擾。沖洗后，將濾膜轉(zhuǎn)移到硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，按照直接接種法中的培養(yǎng)條件和時(shí)間進(jìn)行培養(yǎng)。
結(jié)果判斷：培養(yǎng)結(jié)束后，觀察生長情況。若無微生物生長，則通過無菌檢驗(yàn)；若有微生物生長，則判定為不合格。
無菌試驗(yàn)箱法
設(shè)備準(zhǔn)備：使用專門的無菌試驗(yàn)箱，該試驗(yàn)箱具有良好的密封性和無菌環(huán)境。在試驗(yàn)前，需對試驗(yàn)箱進(jìn)行清潔和消毒處理，可采用紫外線照射、化學(xué)消毒劑擦拭等方法。
放置與培養(yǎng)：放入無菌試驗(yàn)箱中，同時(shí)在試驗(yàn)箱內(nèi)放置一些已知的陽性對照菌株和陰性對照培養(yǎng)基。然后將試驗(yàn)箱密封，按照規(guī)定的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)，一般溫度控制在 30 - 35℃，培養(yǎng)時(shí)間為 7 - 14 天。
結(jié)果評估：培養(yǎng)結(jié)束后，觀及陽性、陰性對照的情況。若陽性對照菌株生長良好，陰性對照無微生物生長，且待檢的培養(yǎng)基也無微生物生長，則判定無菌；若出現(xiàn)異常情況，如陰性對照有菌生長或待檢培養(yǎng)基有微生物生長，則需要分析原因并重新進(jìn)行檢驗(yàn)。
在進(jìn)行無菌檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。同時(shí)，應(yīng)按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定的要求，對檢驗(yàn)過程進(jìn)行記錄和報(bào)告。