藥典培訓(xùn)問答七
發(fā)布時間：
2022-12-24
作者：
全國地名中國培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)
藥典培訓(xùn)問答七
問：計數(shù)方法的驗證：執(zhí)行新版藥典是否就延長培養(yǎng)時間做方法驗證？
答：是。
問：平皿法中提到“每個稀釋級每種培養(yǎng)基至少檢驗2ml供試液”，是每皿注2ml還是每皿注1ml？如要做0.5ml或0.2ml，本級是否還需做1ml?
答：常規(guī)平皿法時每皿注1ml，做2個皿；培養(yǎng)基稀釋法 (即每皿0.5ml或0.2ml)時，供試液總量也應(yīng)是2ml，每1ml菌落數(shù)合計后，2ml的菌落數(shù)再平均；本級就不需做1ml了，但下一級就只做1ml/皿就行了。
問：在細(xì)菌霉菌計數(shù)檢查中，老師提到的每個稀釋級每種培養(yǎng)基至少檢驗2ml供試液，但2010版藥典上并沒有要求要這樣做，那應(yīng)以哪個做法為準(zhǔn)？
答：藥典中對平皿法的描述：平皿法“取供試液1ml，置直徑90mm 的無菌平皿中，注入15～20ml 溫度不超過45℃的溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2 個平板。”這里的描述是以常規(guī)平皿法進(jìn)行描述的，所以“每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2 個平板”，也就是2ml的量。對于培養(yǎng)基稀釋法，請看藥典供試液的制備中3. (6) ①。
問：10版藥典要求檢查沙門菌的供試品，其檢驗量應(yīng)增加20g或20ml， (其中10g或10ml用于陽性對照試驗)是否指20g或20ml樣品中10g或10ml直接用于沙門菌控制檢查，另10g或10ml加pH7.0的緩沖液100ml作為1：10的供試品溶液作為細(xì)菌，霉菌，酵母菌的檢驗嗎？還是指20g都用于沙門菌檢查？
答：20g都是用于沙門菌檢查。沙門菌的檢查法是：取3份200ml營養(yǎng)肉湯，其中2份分別加入10g或10ml樣品，取其中1份加入10~100cfu菌液作陽性對照。第3份加入10ml稀釋劑作陰性對照進(jìn)行檢查，所以。細(xì)菌，霉菌，酵母菌檢驗的樣品不包括在這里。
問：沙門菌檢查為10g或10ml，為何一次檢查量又為20g或20ml？ (P130)
答：其中10g (或10ml)是檢驗用的，另10g (或10ml)是用于陽性對照試驗的。請看上一題目解釋。
問：采用薄膜過濾法時，濾膜采用何種方法滅菌最好？
答：據(jù)我們經(jīng)驗，最好采用一次性過濾器。如果用多次使用的過濾器，則濾膜用濕熱滅菌比較好，因為干熱滅菌后，濾膜較脆，試驗時不容易保證濾膜完整。
問：方法學(xué)驗證時，采用平皿法稀釋級計數(shù)，是否要做稀釋級對照組？
答：稀釋級對照組？是指本底菌組嗎？如果是，那就要。因為要平行試驗，才能知道同一稀釋級的本底菌是多少。如果是指稀釋劑對照組，就不用，因為所用的稀釋劑是藥典規(guī)定的，是無毒性的稀釋劑。
問：方法驗證的培養(yǎng)基稀釋法驗證 (樣品0.2ml)只做2個平皿，每個平皿的加菌量是多少？如果同步加0.2ml菌，其加菌量就達(dá)不到50~100cfu。
答：不管每皿加的供試液的量是多少，每皿加菌液的量都是1ml ,即都是50~100cfu。
問：平皿法 (稀釋法)計數(shù)驗證時，取最低稀釋供試液如0.5毫升和50~100cfu試驗菌，那50~100cfu的試驗菌是指50~100cfu還是50~100cfu∕0.5毫升？我們是要加1毫升還是0.5毫升的試驗菌？
答：平皿法 (稀釋法)計數(shù)驗證時，每皿要加的菌液是50~100cfu，一般我們配制的菌液濃度是50~100cfu/毫升，所以就加1毫升。如果你配制的菌液不是這個濃度，你可以折算，只要加的菌數(shù)是50~100cfu/皿就行了。
問：細(xì)菌霉菌方法驗證，同時做1毫升，0.5毫升，0.2毫升供試品組及供試品驗證組時，菌液是否也按1毫升，0.5毫升，0.2毫升分別加入？此時1毫升，0.5毫升，0.2毫升供試品驗證組中的菌數(shù)能否也達(dá)到50~100cfu？
答：驗證時，不論是1毫升，0.5毫升，0.2毫升的供試液，每皿的加菌量都是50~100cfu，即1毫升 (如果你配制的菌液濃度是50~100cfu/毫升)。
培養(yǎng)基qdrishui