食源性致病菌菌株保藏方法
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
食源性致病菌菌株保藏方法
甘油冷凍保藏法
保藏時間:本方法適合于菌種的長期保藏,保藏時間可達10年以上.
方法:在充分加熱混勻的BHI(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌保存時BHI中NaCl應加至3%)中加入甘油,使甘油達總體積的40%～50%,充分混合,分裝至菌種保存管(2毫升左右),121高壓20min,備用;使用無菌棉簽從非選擇性平板上取新鮮純培養(yǎng)菌落,加入裝有BHI和甘油的無菌凍存管中,混勻后,-80保存(如果無-80冰箱,可選擇-40保存,但保存效果較差).
注意事項:每株菌至少保存2管,分別放置在2個不同凍存盒中,一盒日常使用,另外一盒長期保存;使用時,取出相應的凍存盒,快速接種,以避免反復凍融;使用時,無菌操作,避免污染.
半固體保藏法
保藏時間:本方法適合于短期菌種保藏,保藏時間一般為3～6個月.
方法:無菌操作,挑取待保藏的菌種,穿刺接種約含5毫升無菌半固體營養(yǎng)瓊脂或半固體腦心浸液瓊脂(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌保存時BHI中NaCl應加3%)的小試管(約15mm×100mm)中.無菌操作吸取滅菌液體石蠟,加入已培養(yǎng)好的菌種上面,液體石蠟用量以高出半固體1cm 為準,使菌種與空氣隔絕.將試管直立,置4或室溫(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌)下保存.
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