菌株分離培養(yǎng)特性研究結(jié)果分析
發(fā)布時(shí)間：
2022-12-27
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菌株分離培養(yǎng)特性研究結(jié)果分析
菌株分離培養(yǎng)特性和鏡檢
剖檢觀察病死羔羊肺臟組織,肉眼可見(jiàn)肺臟大部分呈現(xiàn)肉變,并伴有白色化膿灶.分離菌株在綿羊血瓊脂平板上生長(zhǎng)為均一的灰白色、邊緣光滑、濕潤(rùn)的圓形菌落,革蘭氏染色呈現(xiàn)陰性短小桿菌.
分離菌株生化特性
經(jīng)細(xì)菌生化鑒定儀鑒定,分離株與大腸桿菌的生化反應(yīng)特點(diǎn)一致,包括不產(chǎn)生氧化酶、苯丙氨酸脫氨酶、DNA酶以及硫化氫;能產(chǎn)生賴氨酸脫羧酶;分解乳糖,但不利用檸檬酸鹽、D-阿東醇和纖維二糖等,是大腸桿菌的可信度為99%.在麥康凱平板上生長(zhǎng)為紅色、濕潤(rùn)圓形菌落;在伊紅美蘭平板上生長(zhǎng)為黑色帶有金屬光澤圓形菌落;革蘭氏染色鏡檢為陰性桿菌.
分離株16SrRNA基因鑒定結(jié)果
以細(xì)菌DNA為模板,PCR擴(kuò)增大腸桿菌16SrRNA基因序列,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)分離株擴(kuò)增出202bp大小的目的條帶.將測(cè)序序列與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)E.coli參考株16SrRNA基因序列進(jìn)行同源性比對(duì).結(jié)果顯示,分離株16SrRNA基因序列與E.coli參考株CP020933.1、KY906967.1、LC259015.1等相似性均為99%以上.
分離株致病性試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)組小鼠感染后雙目緊閉,被毛潮濕雜亂,呈腹式呼吸,瀕死小鼠表現(xiàn)為全身顫抖,6h內(nèi)全部死亡(100%),而對(duì)照組小鼠無(wú)死亡.剖檢發(fā)現(xiàn)死亡小鼠肝臟腫大,邊緣有出血點(diǎn),脾臟腫大變黑,肺臟充血及出血,局部出現(xiàn)壞死.無(wú)菌采集小鼠肺臟、肝臟、脾臟,均分離到與注射菌一致的大腸桿菌.
藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果
按CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷分離菌株對(duì)青霉素、阿莫西林、頭孢拉定、鏈霉素、慶大霉素、多西環(huán)素、麥迪霉素、氟苯尼考、諾氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、阿奇霉素和克林霉素等14種抗生素耐藥;對(duì)頭孢唑啉、丁胺卡那和多粘菌素B中度耐藥;對(duì)頭孢他啶、頭孢哌酮、氧氟沙星和米諾環(huán)素敏感.
ExPEC毒力因子擴(kuò)增結(jié)果
以細(xì)菌DNA為模板,對(duì)9種ExPEC毒力因子進(jìn)行PCR檢測(cè),擴(kuò)增到iutA(314bp)、fyuA(787bp)和ireA(254bp),且擴(kuò)增片段序列與GenBank參考序列的相似性大于99%.未檢測(cè)到papA、sfaS、focG、hlyD、afa和vaT等基因.
病理組織學(xué)觀察結(jié)果
病死羔羊肺臟支氣管管腔充血,淋巴管擴(kuò)張,周?chē)馨图?xì)胞浸潤(rùn)、增生,肺臟肺泡壁毛細(xì)血管充血,肺泡腔內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn);人工感染小鼠肺臟肺泡腔內(nèi)充滿滲出物,出現(xiàn)肺泡性肺氣腫,肺臟血管管腔充血,淋巴細(xì)胞增生,肺泡周?chē)仔约?xì)胞浸潤(rùn).