金黃色葡萄球菌定義及檢驗方法
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
培養(yǎng)基平皿廠家水監(jiān)測
金黃色葡萄球菌定義及檢驗方法
主題內容與適用范圍
本文規(guī)定了食品中金黃色葡萄球菌的檢驗方法.
本文適用于航空食品的檢驗.
設備和材料
吸管(1毫升、10毫升)、恒溫培養(yǎng)箱(36±1攝氏度)、冰箱、均質器、振蕩器、平皿、稀釋瓶、天平、顯微鏡、接種棒等
培養(yǎng)基和試劑
普通肉湯培養(yǎng)基、胰蛋白胨大豆肉湯、Baird－Prker瓊脂平板、緩沖蛋白胨水(BP)、
凝固酶試驗凍干血漿
凝固酶試驗凍干血漿檢驗程序(非選擇性增菌法)
金黃色葡萄球菌檢驗程序如下：
檢樣25g+225毫升BP胨水
10毫升勻液+10毫升雙料胰胨肉湯
上述混合液+20毫升20％NaCl單料胰胨肉湯
36±1攝氏度2h
B-P平板
36±1攝氏度24h
36±1攝氏度48h
挑可疑菌落,移種到肉湯培養(yǎng)基
36±1攝氏度24h
觀察溶血
涂片染色
凝固酶試驗
報告
操作步驟
稱取25g固體樣品；吸取25毫升液體樣品,加入225毫升BP胨水,固體樣品研磨或置均質器中制成混懸液.
吸取10毫升上述混懸液,接種于10毫升雙料胰蛋白胨大豆肉湯中,置36±1攝氏度培養(yǎng)2小時.
再加入20毫升含20％NaCl的單料胰蛋白胨大豆肉湯,置36±1攝氏度培養(yǎng)24±2小時.
劃線轉種2個表面干燥的Baird－Parker瓊脂平板上,36±1攝氏度培養(yǎng)46±2小時.
挑取可疑菌落移種到肉湯培養(yǎng)基中,置36±1攝氏度溫箱培養(yǎng)24小時.
取肉湯培養(yǎng)物0.3毫升同0.5毫升凝固酶試驗凍干血漿于8毫米*100毫米試管內充分混合,置36±1攝氏度培養(yǎng),定時觀察是否有凝塊形成,至少觀察6h,以內容物完全凝固,使試管倒置或傾斜時不流動為陽性.試驗中需同時做已知陽性和陰性對照.對可疑結果,應進行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗.
本菌為革蘭氏陽性球菌,排列是葡萄球狀,無芽胞,無莢膜,致病性葡萄球菌菌體較小,直徑約為0.5～1μm.在Baird－Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤、直徑為2～3毫米,顏色呈灰色到黑色,邊緣為淡色,周圍為一混濁帶,在其外層有一透明圈.用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度,偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落；但無混濁帶及透明圈.
報告結果
如發(fā)現有凝固酶試驗陽性的菌落,即報告1g(毫升)食品中有金黃色葡萄球菌存在,否則為陰性.
注：本文參照SN0172-92《出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法》