傷寒副傷寒沙門氏菌檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序
發(fā)布時(shí)間：
2022-12-27
作者：
傷寒副傷寒沙門氏菌檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序
1.分離培養(yǎng)
用棉棒直接劃線接種SS平板,36±1培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察菌落特征.傷寒及副傷寒沙門氏菌在SS平板上均呈無色半透明、光滑的中等菌落,菌落中心有黑心,但甲型副傷寒及部分傷寒沙門氏菌菌落無黑心.
平板上若有可疑菌落,挑選出來分別接種三糖鐵斜面.將接種可疑菌的三糖鐵斜面經(jīng)36±1培養(yǎng)18-24小時(shí)后,觀察反應(yīng)情況.
2.生化學(xué)試驗(yàn)
凡是三糖鐵反應(yīng)符合傷寒、副傷寒沙門氏菌特征者,作靛基質(zhì)試驗(yàn),尿素酶試驗(yàn),KCN試驗(yàn)和賴氨酸脫酸酶試驗(yàn).符合者做血清學(xué)試驗(yàn).
傷寒、副傷寒沙門氏菌三糖鐵反應(yīng)結(jié)果
3.血清學(xué)試驗(yàn)
抗原準(zhǔn)備
取三糖鐵斜面培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗(yàn)用的抗原.
O抗原的鑒定
按下列順序進(jìn)行:
H抗原的鑒定
根據(jù)O抗原出現(xiàn)的凝集情況,選用相應(yīng)的H因子血清、檢查第1相與第2相H抗原,如果第2相抗原不凝集,可用位相變異試驗(yàn)檢查.
位相變異試驗(yàn)方法可采用簡(jiǎn)易平板法:將0.5-0.7％半固體瓊脂平板烘干表面水份,取因子血清1環(huán),滴在平板表面,待血清吸收到瓊脂內(nèi),便在血清部位的中央點(diǎn)種待檢菌株,培養(yǎng)后,在形成蔓延生長(zhǎng)的菌苔邊緣取菌檢查.
傷寒、副傷寒沙門氏菌抗原構(gòu)造
注:［］有的菌株有此抗原
4.菌型的判定和結(jié)果報(bào)告
綜合以上生化學(xué)試驗(yàn)和血清學(xué)分型鑒定的結(jié)果,判定菌型,報(bào)告結(jié)果.
質(zhì)量控制要求
1增菌及分離必須保證一個(gè)一支增菌管,一塊平板,禁止多人一管,多人一塊平板.2.分離平板時(shí)平板一半以上應(yīng)有孤立菌落,以供挑選.