實(shí)驗(yàn)室配好的固體培養(yǎng)基再次滅菌能用嗎？
發(fā)布時(shí)間：
2022-11-16
作者：
成品培養(yǎng)基廠家
實(shí)驗(yàn)室配好的固體培養(yǎng)基再次滅菌能用嗎？
二次滅菌有沒(méi)有影響？培養(yǎng)基在沒(méi)打開(kāi)前滅菌多少次之后不可以再次用？
培養(yǎng)基加蒸餾水溶解滅菌，但是在無(wú)菌瓶里沒(méi)開(kāi)封使用吧，我們公司是滅菌兩次（包括兩次）以?xún)?nèi)的可以使用，不能第三次滅菌，滅菌完成的培養(yǎng)基要一直存放在冰箱冷藏（但是在冰箱里存放的也要有時(shí)間的 還是一周時(shí)間內(nèi)使用，如超出需經(jīng)過(guò)驗(yàn)證）。最好只滅一次吧，很多培養(yǎng)基滅第二次的時(shí)候顏色就變了，比如孟加拉紅，應(yīng)該就不能用了。
根據(jù)相關(guān)規(guī)定，遵循先進(jìn)先出的原則，各種試劑及培養(yǎng)基必須在廠家規(guī)定的保質(zhì)期內(nèi)使用，過(guò)期者不得使用。無(wú)水培養(yǎng)基貯存在常溫、干燥處。開(kāi)瓶后需在6個(gè)月內(nèi)使用完畢，超過(guò)期限建議丟棄。配置好的培養(yǎng)基，如孤傲紀(jì)檢過(guò)長(zhǎng)，懷疑染菌，可在使用前在室溫下培養(yǎng)過(guò)夜。若染菌則丟棄。培養(yǎng)基的重復(fù)殺菌次數(shù)不超過(guò)2次。配好的培養(yǎng)基冷藏儲(chǔ)存，最多可以?xún)?chǔ)存兩周。
重復(fù)滅菌需要根據(jù)分類(lèi)，像帶染料的培養(yǎng)基你重復(fù)滅菌會(huì)使顏色變化，不建議重復(fù)滅菌，像營(yíng)養(yǎng)類(lèi)的培養(yǎng)基可以重復(fù)滅菌不超過(guò)2次，而且溫度也不能太高，可以設(shè)置為115℃，這樣可以最大限度地避免營(yíng)養(yǎng)流失?？梢圆捎盟?fù)溶的方式，大約30-40min即可溶解，這個(gè)過(guò)程需不時(shí)地?fù)u晃瓶子。也可用微波爐復(fù)溶，不過(guò)此法危險(xiǎn)，沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)的不提倡使用。
通常情況下培養(yǎng)基是不能兩次滅菌的，一方面培養(yǎng)基里的成分有可能被破壞，另一方面培養(yǎng)基里的水分揮發(fā)，會(huì)造成平板硬化，對(duì)于菌種活化和培養(yǎng)都有影響。所以建議還是重新配制。
如非必須不建議使用，以前實(shí)驗(yàn)室是這樣處理：一次滅菌未使用完畢的培養(yǎng)基存放在錐形瓶中，密封好放置在4℃冰箱中（一般一周左右都會(huì)使用完，盡量現(xiàn)用現(xiàn)配），下次使用時(shí)放在微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱，實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有微波爐的話放在電磁爐上進(jìn)行加熱，盡量減少滅菌次數(shù)，盡量不要重復(fù)使用已經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基。
最好還是現(xiàn)配現(xiàn)用，一次用不完的可以放冰箱貯藏，不必再滅菌吧。
不可以第二次高壓滅菌，可以放水浴中復(fù)溶一次，但必須8小時(shí)內(nèi)用完，藥典中有規(guī)定的。一般使用自制的培養(yǎng)基都是現(xiàn)配現(xiàn)用的，二次殺菌肯定會(huì)對(duì)結(jié)果有影響，如果你懷疑培養(yǎng)基有污染，建議不要用了，重新配一份最好，又不要多長(zhǎng)時(shí)間。
有影響的：發(fā)現(xiàn)二次滅菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂上菌長(zhǎng)得不好，而新滅菌的菌長(zhǎng)勢(shì)不錯(cuò)，所以感覺(jué)還是有影響的。
這個(gè)會(huì)對(duì)PH和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有點(diǎn)影響。就像人，吃飯，咸了會(huì)不太舒服，但是還是飽了。對(duì)于菌只是可能會(huì)稍微影響一下生長(zhǎng)速度和形態(tài)。你們嚴(yán)格的話就重新配置。不嚴(yán)格就直接做沒(méi)太大關(guān)系的。重復(fù)滅菌會(huì)造成培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分的損失，當(dāng)然滅菌后也能用。如果你的實(shí)驗(yàn)要獲取產(chǎn)物就重配吧，只是培養(yǎng)菌體也能長(zhǎng)起來(lái)。一般不重復(fù)滅菌，影響營(yíng)養(yǎng)成分，另外，久置的培養(yǎng)基有時(shí)候效果不好，建議重新配新鮮的。
當(dāng)然也有比較嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那闆r，配好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行高壓濕熱滅菌，培養(yǎng)基不能進(jìn)行二次滅菌。滅菌過(guò)的培養(yǎng)基放入冰箱2-10度冷藏保存 最長(zhǎng)時(shí)間不能超過(guò)一月，最好是放置時(shí)間越短越好。融化瓊脂等培養(yǎng)基時(shí)最多加熱融化二次，第二次融化后未用完就應(yīng)該舍去。如果沒(méi)有特別的要求，最好是重新做一批。這樣就不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果了。如果湊合著用，最終出現(xiàn)不正常的結(jié)果，就不好解釋了。
實(shí)驗(yàn)室自制的培養(yǎng)基，在保證其成分不會(huì)改變條件下保存，即避光、干燥保存，必要時(shí)在5 ℃±3 ℃冰箱中保存，通常建議平板不超過(guò)2周～4周，瓶裝及試管裝培養(yǎng)基不超過(guò)3個(gè)月～6個(gè)月，除非某些標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒?yàn)結(jié)果表明保質(zhì)期比上述的更長(zhǎng)。建議需在培養(yǎng)基中添加的不穩(wěn)定的添加劑應(yīng)即配即用，除非某些標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒?yàn)結(jié)果表明保質(zhì)期更長(zhǎng)；含有活性化學(xué)物質(zhì)或不穩(wěn)定性成分的固體培養(yǎng)基也應(yīng)即配即用，不可二次融化。培養(yǎng)基的貯存應(yīng)建立經(jīng)驗(yàn)證的有效期。觀察培養(yǎng)基是否有顏色變化、蒸發(fā)（脫水）或微生物生長(zhǎng)的情況，當(dāng)培養(yǎng)基發(fā)生這類(lèi)變化時(shí)，應(yīng)禁止使用。培養(yǎng)基使用或再次加熱前，應(yīng)先取出平衡至室溫。
來(lái)自：日水生物qdrishui.cn