微生物培養(yǎng)基菌種保存過(guò)程中如何實(shí)現(xiàn)冷凍保存
發(fā)布時(shí)間：
2022-12-24
作者：
生產(chǎn)培養(yǎng)基廠家
微生物培養(yǎng)基菌種保存過(guò)程中如何實(shí)現(xiàn)冷凍保存
這種保存方法適用于抗凍力強(qiáng)的微生物.這些微生物可在其菌體細(xì)胞外遭受凍結(jié)的情況下而不受損傷,而對(duì)其它大多數(shù)微生物而言,無(wú)論在細(xì)胞外凍結(jié)還是在細(xì)胞內(nèi)凍結(jié),都會(huì)對(duì)菌體造成損傷,當(dāng)采用這種保藏方法時(shí),應(yīng)注意以下幾點(diǎn):
要選擇適于冷凍干燥的菌齡細(xì)胞.
要選擇適宜的培養(yǎng)基,因?yàn)槟承┪⑸飳?duì)冷凍的抵抗力,常隨培養(yǎng)基成分的變化而顯示出巨大差異.
要選擇合適的菌液濃度,通常菌液濃度越高,生存率越高,保存期也越長(zhǎng).
最好在菌液內(nèi)不添加電解質(zhì)(如食鹽等).
可在菌液內(nèi)添加甘油等保護(hù)劑,以防止在冷凍過(guò)程中出現(xiàn)菌體大量死亡的現(xiàn)象.同樣,也可添加各種糖類、去纖維血液和脫脂牛乳等具有良好保護(hù)效果的溶劑,但對(duì)有些微生物而言,不加保護(hù)劑時(shí)更有效.
原則上應(yīng)盡快進(jìn)行冷凍處理,但當(dāng)加入保護(hù)劑時(shí),可靜置一段時(shí)間后再進(jìn)行處理.
就動(dòng)物細(xì)胞而言,應(yīng)在-20攝氏度范圍內(nèi)以1攝氏度/分鐘左右的速度緩慢降溫,此后必須盡快降到貯藏溫度;而對(duì)絕大多數(shù)微生物而言,則不必如此,如結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜的原蟲則可在-35攝氏度范圍內(nèi)進(jìn)行緩慢降溫,而噬菌體則必需采用上述的二階段法進(jìn)行冷凍.
若進(jìn)行長(zhǎng)期保存,則貯藏溫度越低越好.
取用冷凍保存的菌種時(shí),應(yīng)采取速融措施,即在35～40攝氏度溫水中輕輕振蕩使之迅速融解.而就厭氧菌來(lái)說(shuō),則應(yīng)選擇靜置融化的措施.當(dāng)冷凍菌融化后,應(yīng)盡量避免再次冷凍,否則菌體的存活率將顯著下降.
