GB5009.89-2016食品中煙酸和煙酰胺的測定
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
GB5009/5413系列相關培養(yǎng)基的用途及特點
一.GB5009.89-2016食品中煙酸和煙酰胺的測定
1.定義
煙酸也稱作維生素B3,或維生素PP,分子式:C6H5NO2,耐熱,能升華.煙酸又名尼克酸.抗癩皮病因子.在人體內還包括其衍生物煙酰胺或尼克酰胺.它是人體必需的13種維生素之一,是一種水溶性維生素,屬于維生素B族.煙酸在人體內轉化為煙酰胺,煙酰胺是輔酶Ⅰ和輔酶Ⅱ的組成部分,參與體內脂質代謝,組織呼吸的氧化過程和糖類無氧分解的過程.
2.本標準代替GB/T5009.89-2003《食品中煙酸的測定》.GB5413.15-2010《食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品種煙酸和煙酰胺的測定》和GB/T9695.25-2008《肉與肉制品維生素PP含量測定》
3.第一法微生物法
原理：煙酸(煙酰胺)是植物乳桿菌(ATCC8014)生長所必需的營養(yǎng)素,在一定控制條件下,利用植物乳桿菌對煙酸和煙酰胺的特異性,在含有煙酸和煙酰胺的樣品中生長形成的光密度來測定煙酸和煙酰胺的含量.
涉及培養(yǎng)基種類：
12301乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基；
12302乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基；
12304/12315煙酸測定用培養(yǎng)基
培養(yǎng)基涉及流程詳解
儲備菌種的制備
將菌種植物乳桿菌(ATCC8014)轉接至乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基中,在36攝氏度±1攝氏度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h至24h,取出后放入2攝氏度至4攝氏度冰箱中保存.每月至少傳種一次,作為儲備菌株保存.實驗前將儲備菌株接種至乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基中,在36攝氏度±1攝氏度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h至24h以活化菌株,用于接種液的制備.保存數(shù)周以上的儲備菌種,不能立即用作接種液制備,實驗前宜連續(xù)傳種2代至3代以保證菌株活力.
接種液的制備
試驗前一天,從乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基移取部分菌種于滅菌的10毫升乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基中,于36攝氏度±1攝氏度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h至18h.在無菌條件下離心該培養(yǎng)液15分鐘,傾去上清液.加入10毫升已滅菌的生理鹽水重新分散細胞,于旋渦混合器上快速混合均勻,離心15分鐘,傾去上清液.重復離心和清洗步驟三次.以第三次細胞分散液中吸取1毫升加入10毫升已滅菌的生理鹽水,使其充分混合均勻制成混懸液,備用.用721分光光度計,在550nm波長下,以0.9%生理鹽水為參比,讀取該菌懸液的透光值,用0.9%生理鹽水或第三次細胞分散液調整透光值,使其范圍60%至80%之間.立即使用.