GB5009/5413系列相關培養(yǎng)基的用途及特點
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
GB5009/5413系列相關培養(yǎng)基的用途及特點
GB5009.154—2016 食品中維生素B6的測定
1,定義
維生素B6(Vitamin B6)又稱吡哆素,其包括吡哆醇,吡哆醛及吡哆胺,在體內以磷酸酯的形式存在,是一種水溶性維生素,遇光或堿易破壞,不耐高溫.1936年定名為維生素B6.維生素B6為無色晶體,易溶于水及乙醇,在酸液中穩(wěn)定,在堿液中易破壞,吡哆醇耐熱,吡哆醛和吡哆胺不耐高溫.維生素B6在酵母菌,肝臟,谷粒,肉,魚,蛋,豆類及花生中含量較多.維生素B6為人體內某些輔酶的組成成分,參與多種代謝反應,尤其是和氨基酸代謝有密切關系.臨床上應用維生素B6制劑防治妊娠嘔吐和放射病嘔吐.
2,本標準代替GB/T5009.154—2003《食品中維生素B6的測定》,GB5413.13—2010《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素B6的測定》.
3,第二法 微生物法
①原理
食品中某一種細菌的生長必須要有某一種維生素的存在, 卡爾斯伯酵母菌在有維生素B6存在的條件下才能生長, 在一定條作下維生素B6的量與其生長呈正比關系.用比濁法測定該菌在試樣液中生長的渾濁度,與標準曲線相比較得出試樣中維生素B6的含量.
②涉及培養(yǎng)基種類：
12309吡哆醇Y培養(yǎng)基
12309-1吡哆醇Y瓊脂培養(yǎng)基
11154麥芽浸粉瓊脂培養(yǎng)基
11170-1YM 肉湯培養(yǎng)基
11171-1YM 肉湯瓊脂培養(yǎng)基
③培養(yǎng)基涉及流程詳解
菌種的制備及保存( 避光處理)
菌種復壯:卡爾斯伯酵母, ATCC#9080菌種或等效菌種凍干品,加入約0.5mLYM肉湯培養(yǎng)基或生理鹽水復溶,取幾滴復溶的菌液分別接種2支裝有10mLYM肉湯培養(yǎng)基的試管中, 于30℃水浴振蕩培養(yǎng)20h~24h .
月儲備菌種制備: 將菌種復壯培養(yǎng)液劃線接種于YM肉湯瓊脂培養(yǎng)基(傳代培養(yǎng)基)斜面上, 于3 0℃培養(yǎng)20h~24h ,于 2℃~8℃冰箱內保存,此菌種為第一代月儲備菌種;以后每月將上一代的月儲備菌種劃線接種于YM肉湯瓊脂培養(yǎng)基(傳代培養(yǎng)基)斜面,于3 0℃培養(yǎng)20h~24h ,于2℃~8℃冰箱內保存,有效期一個月,此菌種為當月儲備菌種.
周儲備菌種制備: 每周從當月儲備菌種接種于YM肉湯瓊脂培養(yǎng)基(傳代培養(yǎng)基)斜面, 于3 0℃培養(yǎng)20h~24h ,于2℃~8℃冰箱內保存,有效期7d .保存數星期以上的菌種, 不能立即用作制備接種液之用, 一定要在使用前每天移種一次, 連續(xù)2d~3d ,方可使用,否則生長不好.
接種菌懸液制備:在維生素B6測定實驗前一天,將周儲備菌種轉接于10mLYM肉湯培養(yǎng)基(種子培養(yǎng)液)中,可同時制備2管,于30℃振蕩培養(yǎng)20h~24h ,得到測定用的種子培養(yǎng)液, 從月儲備菌種到種子培養(yǎng)液總代數不超過5代.將該種子培養(yǎng)液于3000r/min下離心10min ,傾去上清液;用10mL生理鹽水洗滌,離心,傾去上清液, 用生理鹽水重復洗滌2次; 再加10mL消毒過的生理鹽水,將離心管置于渦旋混勻器上充分混合, 使菌種成為混懸液, 將此菌懸液倒入已消毒的注射器內, 立即使用.
?試樣處理
標準曲線的制備:3組試管各加0.00mL,0.02mL,0.04mL,0.08mL,0.12mL和0.16mL吡哆醇工作液,再加吡哆醇Y培養(yǎng)基補至5.00mL ,混勻,加棉塞.
試樣管的制備:在試管中分別加入0.05mL,0.10mL,0.20mL樣液, 再加入吡哆醇Y培養(yǎng)基補至5.00mL , 用棉塞塞住試管,將制備好的標準曲線和試樣測定管放入高壓釜121℃下高壓滅菌10min ,冷至室溫備用.
三,GB5009.210—2016食品中泛酸的測定
1,定義
泛酸也稱作維生素B5,遍多酸,無臭,味微苦,因其性質偏酸性并廣泛存于多種食物中,故而得名.一般公認泛酸與頭發(fā),皮膚的營養(yǎng)狀態(tài)密切相關,當頭發(fā)缺乏光澤或變得較稀疏時,多補充泛酸可見其效；制造抗體也是泛酸的作用之一,能幫助人體抵抗傳染病,緩和多種抗生素副作用及毒性,減輕過敏癥狀.泛酸缺乏易引起血液及皮膚異常,產生低血糖等癥.
2,第一法 微生物法測定食品中的泛酸
①原理
泛酸是植物乳桿菌(ATCC8014)生長所必需的營養(yǎng)素, 在一定控制條件下, 將植物乳桿菌液接種至含有試樣液的培養(yǎng)液中, 培養(yǎng)一定時間后測定透光率( 或吸光度值) , 根據泛酸含量與透光率( 或吸光度值) 的標準曲線計算出試樣中泛酸的含量.
