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化妝品中菌落總數(shù)的檢查

發(fā)布時間:

2022-12-27

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化妝品中菌落總數(shù)的檢查

隨著化妝品使用越來越廣泛.已成為人們?nèi)粘I钪械谋匦杵?開展化妝品衛(wèi)生質(zhì)量監(jiān)測.是保障人民健康維護消費者的利益,如使用了細菌總數(shù)超標的化妝品.會導(dǎo)致皮膚感染.因此,化妝品細菌總數(shù)測定是便于判明樣品被污染的程度.是對樣品進行衛(wèi)生學(xué)評價的重要依據(jù).
 
實驗原理
 
菌落總數(shù)是指化妝品檢樣經(jīng)過處理,并在一定條件下培養(yǎng)后,得到的1克或1毫升檢樣中所含細菌菌落的總數(shù).
菌落總數(shù)的測定(平板活菌計數(shù)法)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的菌落(即由一個單細胞繁殖而成,且肉眼可見的子細胞群體)的生理及培養(yǎng)特征進行的.也就是說,一個菌落即代表一個單細胞.
 
測定時,首先將待測樣品制成均勻的、一系列不同稀釋度的稀釋液,并盡量使樣品中的微生物細胞分散,使之成為單個細胞狀態(tài)存在(否則1個菌落就不能代表1個菌);再取一定稀釋倍數(shù)的一定量稀釋液接種到培養(yǎng)基上,使其均勻分布.菌落由單個細胞生長繁殖而成,因此通過統(tǒng)計菌落的數(shù)目,可計算樣品中的含菌數(shù).
由于所計算出的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù),故不包括死菌,因此菌落總數(shù)的測定又稱為活菌計數(shù).
 
菌落總數(shù)可作為判定食品被污染程度的標志,也可用于觀察細菌在食品中繁殖的動態(tài),以便在對被檢樣品進行衛(wèi)生學(xué)評價時提供依據(jù).
前邊所述的細菌菌落總數(shù)實際上僅為樣品中總細菌數(shù)的一部分,其余細菌皆因種種原因未能長出.每種細菌都有其一定的生理特性,欲將各種細菌都有培養(yǎng)出來,就必須創(chuàng)造各種不同的培養(yǎng)條件,包括營養(yǎng)、溫度、pH、需氧性等,去滿足各種細菌的要求.在實際工作中,不可能也不必要培養(yǎng)出所有的細菌,所得結(jié)果只是能在肉汁營養(yǎng)瓊脂上生長的嗜中溫需氧性的菌落總數(shù).
儀器設(shè)備
 
培養(yǎng)箱:(36±1).恒溫水浴鍋:(46±1).天平.滅菌廣口瓶或三角瓶:500毫升.滅菌培養(yǎng)皿:皿底直徑9.0.滅菌吸管:1.0、10.1.滅菌小試管.玻璃珠:直徑5.均質(zhì)機.滅菌刀、剪刀、鑷子.酒精燈.
 
培養(yǎng)基和試劑
 
(1)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
成分:蛋白胨10克瓊脂15至20克牛肉膏3克蒸餾水1000毫升氯化鈉5克pH7.2至7.4
制法:將除瓊脂以外的各成分溶于蒸餾水中,用15%的NaOHt調(diào)節(jié)pH使之在7.2至7.4.加入瓊脂,于121下高壓滅菌15分鐘
(2)生理鹽水
成分:NaCl0.9克蒸餾水100毫升
制法:一般每種檢樣配制250毫升無菌生理鹽水.稱取2.2克NaCl,加入250毫升蒸餾水溶解;分裝于2支大試管中,每支9毫升;再量取225毫升裝于500毫升廣口瓶或三角瓶中,并加入適量的玻璃珠;剩余的裝入另1支試管中,包扎后于121下高壓滅菌15分鐘.
(3)75%的酒精棉球.
實驗步驟
化妝品菌落總數(shù)檢測圖
在無菌條件下,將25毫升(或25g)檢樣剪碎,放入裝有225毫升無菌生理鹽水和適量玻璃珠的500毫升廣口瓶或三角瓶內(nèi),經(jīng)充分振搖,形成10-1均勻稀釋液.
用1毫升的無菌吸管吸取10-1稀釋液1毫升,注入裝有9毫升無菌生理鹽水的試管內(nèi),振搖混合均勻,即為10-2稀釋液.再用此吸管吸取10-1稀釋液各1毫升于2個培養(yǎng)皿內(nèi).
另取1毫升的無菌吸管吸取10-2稀釋液1毫升,注入裝有9毫升無菌生理鹽水的試管內(nèi),振搖混合均勻,即為10-3稀釋液.再用此吸管吸取10-2稀釋液各1毫升于2個培養(yǎng)皿內(nèi).
采用相同的方法吸取10-3稀釋液各1毫升于2個培養(yǎng)皿內(nèi).
檢樣在36±1下48h后營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中細菌的菌落數(shù).
日水培養(yǎng)基的圖片