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微生物檢查中的MPN法和CFU法

發(fā)布時(shí)間:

2022-12-27

作者:

配置好的生物培養(yǎng)基


微生物檢查中的MPN法和CFU法

 
MFN(mostprobablenumber)法即最近似數(shù)法,也稱為最大可能數(shù)法,是食品檢驗(yàn)中常用的方法。
 
其生化反應(yīng)基礎(chǔ)為乳糖發(fā)酵,革蘭陰性菌的無(wú)芽胞桿菌,如大腸菌群,一般在37攝氏度、24小時(shí)發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣。
 
利用此原理,將供試液加到發(fā)酵培養(yǎng)基中,37攝氏度培養(yǎng)24小時(shí)。
 
若不產(chǎn)氣,則報(bào)告控制菌陰性;若產(chǎn)氣,則需劃線接種于平板上,37攝氏度培養(yǎng)24小時(shí)后,觀察菌落形態(tài)、革蘭染色和重發(fā)酵驗(yàn)證。
 
優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便、靈敏度較高,時(shí)間短,可直接觀察試管得出結(jié)論,若發(fā)酵培養(yǎng)基不產(chǎn)氣,24小時(shí)即可報(bào)告控制菌陰性。
 
缺點(diǎn):要求樣品具有均一性,適合檢驗(yàn)液體樣品,且只能用于檢驗(yàn)在發(fā)酵培養(yǎng)基中產(chǎn)氣的菌種。
 
注意事項(xiàng):需選擇合適的稀釋度和接種量。
 
CFU(colonyformingunits)法即平板計(jì)數(shù)法,是食品和藥品檢驗(yàn)中常用的方法。
 
 
原理為lg或l毫升樣品中所含的活菌數(shù)量,通過(guò)將處理后的樣品在一定條件下培養(yǎng)后計(jì)算生長(zhǎng)出來(lái)的菌落數(shù)(CFU),即在一定體積的細(xì)菌培養(yǎng)液在固態(tài)培養(yǎng)基上形成的菌落數(shù)。
 
液體樣品可直接稀釋成供試液,固體樣品需在滅菌的生理鹽水中浸泡制成供試液。
 
將不同稀釋度的供試液吸取l毫升,放入滅菌的平皿內(nèi),再傾注融化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂,待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,37攝氏度培養(yǎng)4天,計(jì)算平皿內(nèi)的菌落數(shù)。
 
CFU法應(yīng)用廣泛,但檢驗(yàn)過(guò)程必須嚴(yán)格無(wú)菌,以防污染雜菌,而且檢驗(yàn)所需時(shí)間較長(zhǎng),同時(shí)也需選擇合適的稀釋度和接種量。