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結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA為什么不能過(guò)度加熱

發(fā)布時(shí)間:

2022-12-24

作者:

國(guó)內(nèi)大型生物試劑公司


MC瓊脂含中性紅,可以121攝氏度高壓滅菌15分鐘,見(jiàn)GB4789.35-2010,乳糖膽鹽培養(yǎng)基也可以高溫滅菌,見(jiàn)GBT4789.3-2003。有分解說(shuō),長(zhǎng)時(shí)間高溫結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂會(huì)導(dǎo)致抑制物的降解從而降低選擇性。過(guò)度加熱高溫會(huì)令結(jié)晶紫和中性紅失效。
 
可以在盆子里煮沸(不會(huì)噴沸騰,快沸的時(shí)候,把火調(diào)小慢慢沸就好了,要溢出就從電爐上拿下來(lái))控制著別讓它溢出來(lái)就可以了,接觸的用具應(yīng)該不用滅菌,倒進(jìn)瓶里備用。不同牌子有些VRBA寫著可以高壓滅菌,有些不可以。有的實(shí)驗(yàn)室用溫度恒定的電熱板,實(shí)際操作中不用具體到2分鐘,加熱煮沸后取下即可,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生影響。
 
青島日水結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)配制方法:稱取本品44.5g于1L蒸餾水或去離子水中(可按比例增加或減少配制量),攪拌煮沸溶解2分鐘,冷卻至50—55℃傾注平板。
 
 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂需要高壓滅菌嗎?不需要高壓滅菌,VRBA是選擇性培養(yǎng)基,在其上面只大腸菌群顯色。其它的菌落不會(huì)顯示顏色的,所以不用滅菌的。該培養(yǎng)基只能夠生長(zhǎng)出大腸菌群類的菌落,而其他類的菌落生長(zhǎng)不出來(lái),所以不需要高壓滅菌,因里面還有瓊脂成分,故需要加熱到沸騰,讓瓊脂充分溶解。并非不能夠高壓滅菌,而是這么做浪費(fèi)。
 
百科普及:VRBA菌落顯紅色的原理是菌株利用乳糖產(chǎn)酸,中性紅遇酸變紅,因此菌落也是紅色的,并且因?yàn)槔锩嬗心扄},在較低pH值時(shí)會(huì)出現(xiàn)沉淀環(huán),就是我們看到的菌落周圍的暈圈了。但某些不利用乳糖產(chǎn)酸的細(xì)菌如沙門在VRBA表面生長(zhǎng)時(shí)是無(wú)色的,但是跑到培養(yǎng)基內(nèi)部就會(huì)變成紅色了,這種菌會(huì)影響我們的判斷,因此需要做BGLB來(lái)確證。
來(lái)自青島日水生物  (結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA為什么不能過(guò)度加熱?)