濾膜法測(cè)定水中大腸菌群

發(fā)布時(shí)間：

2022-12-27

作者：

培養(yǎng)基干粉顆粒

濾膜法測(cè)定水中大腸菌群

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)使用濾膜法測(cè)定水中大腸菌群.

實(shí)驗(yàn)原理:濾膜法是采用濾膜過(guò)濾器過(guò)濾水樣,使其中的細(xì)菌截留在濾膜上,然后將濾膜放在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),大腸菌群可直接在膜上生長(zhǎng),從而可直接計(jì)數(shù).所用濾膜是一種多孔硝化纖維膜或乙酸纖維膜,其孔徑約0.45μm.

試劑與器材:無(wú)菌水,河水或湖水；

伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基:蛋白胨10克, 乳糖10克,K2HPO42克, 伊紅Y0.4 克, 美藍(lán)0.065 克,瓊脂20 克,水1000ml,pH 7.2

器材:滅菌過(guò)濾器(可用高壓蒸汽滅菌),鑷子,濾膜,燒杯等.

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

濾膜滅菌:將濾膜放入裝有蒸餾水的燒杯中,加熱煮沸15分鐘,共煮沸三次,前兩次煮沸后換水洗滌2-3次再煮,以洗去濾膜上殘留的溶劑.

濾膜過(guò)濾器裝置:將濾膜裝入過(guò)濾器中,過(guò)濾裝置進(jìn)行高壓滅菌.

加水樣過(guò)濾:對(duì)未知的水樣可做三個(gè)稀釋度,選擇菌落數(shù)合適的稀釋度進(jìn)行計(jì)算.用針筒取河水或湖水10mL,緩慢過(guò)濾.

濾完后,加入等量的滅菌水繼續(xù)抽濾,目的是沖洗針筒壁.

濾畢,用滅菌鑷子取濾膜邊緣,將沒(méi)有細(xì)菌的一面緊貼在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上.濾膜與培養(yǎng)基之間不得有氣泡.

將平板倒置于37℃下培養(yǎng)22-24小時(shí).

挑取符合大腸菌群菌落特征(紅色,有金屬光澤)的菌落,進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢.

計(jì)算:1升水樣中的大腸菌群數(shù)=濾膜上的大腸菌群菌落數(shù)×10