配制胰胳大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平皿需要放置多長時間？
發(fā)布時間：
2022-12-27
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配制胰胳大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平皿需要放置多長時間？
根據(jù)GB16294，碟子的數(shù)量按照面積有劃分，培養(yǎng)基種類沒有具體規(guī)定，大部分企業(yè)使用的是TSA的，擺放時間國標上有說明，GMP附錄部分也做了相應的規(guī)定。GMP有提碟子放置時間不宜過短，暴露時間至少為30分鐘，不大于4小時。應對沉降碟的暴露時間進行確認，保證不會因為失水等原因影響微生物生長。所以還是得對沉降碟的暴露時間進行確認。
沉降菌監(jiān)測分動態(tài)和靜態(tài)，動態(tài)自己定多少個監(jiān)測點，但一定要保持生產(chǎn)中連續(xù)監(jiān)測，一般培養(yǎng)皿最長可以放4個小時。靜態(tài)一般一個房間2個監(jiān)測點，但A級最少要14個培養(yǎng)皿。靜態(tài)一般30分鐘就可以了。
沉降菌計數(shù)是4小時累計計數(shù)，單個碟子放置的時間應該根據(jù)自己所做的驗證決定，可以半小時，也可以4小時，也可以更長。放置時間還要考慮沉降碟是否在放置時間內(nèi)失效，有些廠家生產(chǎn)的沉降碟放置四小時培養(yǎng)基會變干。
單個碟子的暴露時間可以少于4小時，取決于你的取樣環(huán)境，如風速過快培養(yǎng)基水分流失快，影響培養(yǎng)基回收率。如放了4小時后回收率都達不到，從而影響結(jié)果準確性；同一位置可以使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。一般是用單個碟子暴露4小時，考察成品平板供應商也會做這個考慮的。
一般培養(yǎng)皿適用性試驗中還要做，培養(yǎng)皿在潔凈區(qū)放置4小時（看公司的規(guī)定）后，加菌液，計算回收率，如果大于70%，則證明可以放置4小時。
日水培養(yǎng)皿圖片
建議參考GB/T 16294—1996醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法
采樣方法：將已制備好的培養(yǎng)皿按5.4.1.2的要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。
采樣點的布置：采樣點的位置可以同懸浮粒子測試點。工作區(qū)采樣點的位置離地0.8米至1.5米左右（略高于工作面）?？稍陉P(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加采樣點。
另外，培養(yǎng)皿里面用的瓊脂，時間長了自然會干了，即使再加純凈水也不好用了，只能報廢。
***平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基滅菌后放置一段時間，里面出現(xiàn)毛絨絨的絮狀物原因是：平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的滅菌溫度121攝氏度，時間15-30分鐘。這是滅菌常用的時間溫度，在培養(yǎng)基不含糖并且各種成分均相對耐熱的情況下均使用這一溫度和時間。
知識百科普及：培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細胞培養(yǎng)的實驗室器皿，由一個平面圓盤狀的底和一個蓋組成，一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類，主要為塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作，可以用于植物材料的培養(yǎng)。
培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類，主要為塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作，可以用于植物材料的培養(yǎng)。
培養(yǎng)皿清潔步驟：
浸泡：新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡，軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗，然后用5%鹽酸浸泡過夜；用過的玻璃器皿往往附有大量蛋白質(zhì)和油脂，干涸后不易刷洗掉，故用后應立即浸入清水中備刷洗。
刷洗：將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中，用軟毛刷反復刷洗。不要留死角，并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干，備浸酸。
浸酸：浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中，又稱酸液，通過酸液的強氧化作用清除器皿表面的可能殘留物質(zhì)。浸酸不應少于六小時，一般過夜或更長。放取器皿要小心。
沖洗：刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗，浸酸后器皿是否沖洗的干凈，直接影響到細胞培養(yǎng)的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿，每件器皿至少要反復“注水-倒空”15次以上，最后用重蒸水浸洗2-3次，晾干或烘干后包裝備用。
來自：青島日水生物