營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
國內(nèi)做培養(yǎng)基比較好的公司
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的質(zhì)量要求、檢驗方法.使用說明、標(biāo)志、標(biāo)簽以及包裝、運輸、貯存
本標(biāo)準(zhǔn)適用于一般細(xì)菌培養(yǎng)的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款.凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn),然面,鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)
GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志
中華人民共和國藥典(2005年版)
JJF1070--2000定量包裝商品凈含量計量檢驗規(guī)則
術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)
培養(yǎng)基culturemedium
由人工方法配合而成的,專供微生物培養(yǎng)、分離.鑒別、研究和保存使用的混合營養(yǎng)物制品
質(zhì)控藺株qualitycontrolstrain
質(zhì)控菌株通常指用于培養(yǎng)基質(zhì)量控制和性能測定的微生物
菌落形成單位colonyfor分鐘gunit,cfu
菌落形成單位是指在活菌培養(yǎng)計數(shù)時,由單個菌體或聚集成團(tuán)的多個菌體在固體培養(yǎng)基上生長繁殖所形成的集落,以其表達(dá)活菌的數(shù)量
培養(yǎng)基配方
單位為:g/L
蛋白胨10.0g
氯化鈉5.0g
牛肉浸出粉3.0g至5.0g
瓊脂12.0g至14.0g
質(zhì)量要求
理化要求
外觀
應(yīng)為均一的淡黃色粉末
裝量
應(yīng)不低于標(biāo)示量
pH值
滅菌后,20攝氏度至25攝氏度時,該培養(yǎng)基pH值應(yīng)為7.2士0.2
干燥失重
應(yīng)不超過6.0%
生長試驗
空白對照平皿應(yīng)無菌生長,大腸埃希菌的菌落為S型,為半透明:金黃色葡萄球菌的菌落為S型,產(chǎn)生明顯的金黃色色素;銅綠假單胞菌的菌落為R型,產(chǎn)生明顯的綠色色素.該培養(yǎng)基接種質(zhì)控菌株,生長情況應(yīng)符合以上要求且生長良好
檢驗方法
理化檢驗
外觀
采用目測法,在自然光線明亮處目視,應(yīng)符合規(guī)定
裝量
按JJF1070-2000,使用通用量具,測定裝量,應(yīng)符合5.1.2的規(guī)定
pH值.
按使用說明配制培養(yǎng)基,取6毫升.新鮮配制的液體培養(yǎng)基,加新鮮蒸餾水至40毫升,滅菌后.在20攝氏度至25攝氏度時,按《中華人民共和國藥典》(2005年版)pH值測定法測定,應(yīng)符合5.1.3的規(guī)定
干燥失重
按《中華人民共和國藥典》(2005年版)干燥失重測定法.在60C時壓力2.67kPa(20mmHg)以下干燥至恒重,應(yīng)符合5.1.4的規(guī)定
生長試驗
按附錄A試驗方法進(jìn)行,結(jié)果應(yīng)符合規(guī)定
使用說明
使用說明至少應(yīng)當(dāng)具有下列內(nèi)容:
產(chǎn)品名稱、規(guī)格:
配方;
用途;
使用方法;
注意事項:
貯存條件與失效期:
生產(chǎn)單位名稱、聯(lián)系方式
標(biāo)志與標(biāo)簽
標(biāo)志與標(biāo)簽至少應(yīng)當(dāng)具有下列內(nèi)容:
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號:
產(chǎn)品注冊證號:
產(chǎn)品名稱、規(guī)格、數(shù)量.批號:
制造廠名稱、商標(biāo)和廠址;
貯存條件和失效期
包裝.運輸.貯存
包裝
包裝儲運圖示標(biāo)志應(yīng)符合GB/T191的規(guī)定.包裝容器應(yīng)保證密封性良好,不易破碎
運輸
培養(yǎng)基在運輸過程中.應(yīng)防湖.應(yīng)防止重物堆壓.避免陽光直射和雨雪浸淋,防止與酸堿物質(zhì)接觸,防止內(nèi)外包裝破損
貯存
產(chǎn)晶應(yīng)置陰涼干燥處貯存
附錄A
(規(guī)范性附錄)
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基生長試驗方法
A.1質(zhì)控菌株
金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)[CMC(B)26001]
大腸埃希菌(Escherichiacoli))[CMCC(B)44113]
銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)[CMCC(B)10110]
培養(yǎng)基生長試驗可采用上述菌株或其他等同的標(biāo)準(zhǔn)菌株,所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代(從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為第0代),并采用適宜的菌種保藏技術(shù),以保證試驗菌株的生物學(xué)特性
不應(yīng)同時操作2個以上菌株
A.2方法
A.2.1無菌操作要求
培養(yǎng)基生長試驗應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,防止微生物污染.稀釋液、培養(yǎng)基、實驗器具等滅菌時,應(yīng)照中華人民共和國藥典(2005年版)滅菌法的要求,采用驗證合格的滅菌程序滅菌
A.2.2菌種復(fù)蘇
啟開金黃色葡萄球菌.大腸埃希菌、銅綠假單胞菌菌種,用0.9%無菌氣化鈉溶液0.3mI.制成菌懸液,加至7毫升營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,30攝氏度至35個培養(yǎng)24h
A.2.3菌種傳代
取1毫升上述復(fù)蘇后的金黃色葡萄球菌.大腸埃希菌、錒綠假單胞菌新鮮培養(yǎng)物,加至7毫升營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,30攝氏度至35攝氏度培養(yǎng)24h
A.2.4
菌種增菌培養(yǎng)
接種.上述傳代后的金黃色葡萄球菌.大腸埃希菌.銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯或營養(yǎng)瓊
脂培養(yǎng)基中,30攝氏度至35攝氏度培養(yǎng)18h至24h
A.2.5菌懸液制備
將上述增菌培養(yǎng)后的金黃色葡萄球菌.大腸埃希菌、銅綠偎單胞菌的新鮮培養(yǎng)物分別用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1毫升含菌數(shù)約相當(dāng)于100cfu至1000cfu的菌懸液
A.2.6培養(yǎng)基接種
用蒸餾水或去離子水按說明上的濃度配制待檢營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,121攝氏度滅菌15分鐘后.稍冷后在每個平皿(直徑為90mm)中加人約15毫升至20毫升,待冷卻至室溫凝固后進(jìn)行檢測
檢測時,每個平皿加入0.1毫升上述菌懸液.每種質(zhì)控菌株接種2個平皿,并用1個未接種的培養(yǎng)基平皿做空白對照,置30C至35個培養(yǎng)24h至48h.觀察菌落生長情況,并記錄結(jié)果.結(jié)果應(yīng)符合5.2的要求