微生物檢驗(yàn)中的菌種濾片保藏方法和復(fù)蘇研究
發(fā)布時(shí)間：
2022-12-27
作者：
菌種的濾紙片保藏法及復(fù)蘇
濾紙片的準(zhǔn)備
用打孔器將濾紙制成直徑約3mm的圓形小紙片,放入普通玻璃小瓶中,121°C高壓滅菌30分鐘后備用.
菌種的準(zhǔn)備
將需要保存的菌種,在適宜的斜面培養(yǎng)基或平板培養(yǎng)基上培養(yǎng),使其充分生長(zhǎng).
菌種保存
抽真空方法
(1)取滅菌脫脂牛乳1-2ml滴加在滅菌培養(yǎng)皿或試管內(nèi),挑取數(shù)環(huán)菌苔在牛乳內(nèi)混勻,制成濃懸液.(2)用滅菌鑷子夾住高壓滅菌后的濾紙片浸入菌懸液內(nèi),使其自然吸飽,小心放入滅菌后的菌種保存玻璃瓶?jī)?nèi),每瓶至少放置10片,然后蓋上瓶蓋(注意留有小縫隙,不要蓋緊).(3)在玻璃瓶外壁上注明菌種編號(hào)、種類、名稱、保存時(shí)間等信息.(4)將玻璃瓶放入內(nèi)有五氧化二磷作吸水劑的干燥器中,用真空泵抽氣至干(如果沒(méi)有干燥器,也可直接抽氣至干).(5)將干燥后的裝有菌片的玻璃瓶放置于-20°C及以下低溫冰箱冷凍保存.
上述濾紙片保存法需要抽真空,如果實(shí)驗(yàn)室不具備抽真空的條件,用如下方法.
無(wú)需抽真空方法
(1)用無(wú)菌小鑷子夾住濾紙片,每片在細(xì)菌平板上刮取菌苔,或至少刮取3-5個(gè)單菌落,然后將濾紙片放入菌種保存玻璃瓶?jī)?nèi),每瓶至少放置10片,然后直接蓋緊瓶蓋.(2)在玻璃瓶外壁上注明菌種編號(hào)、種類、名稱、保存時(shí)間等信息.(3)將干燥后的裝有菌片的玻璃瓶放置于-20°C及以下低溫冰箱冷凍保存.
菌種復(fù)蘇
當(dāng)需要復(fù)蘇使用菌種時(shí),從菌種保存玻璃瓶中取出1-2片濾紙片,用少量生理鹽水浸泡后,劃線接種于適宜的固體培養(yǎng)上；或直接將濾紙片放入適宜的液體培養(yǎng)基內(nèi),置培養(yǎng)箱中培養(yǎng).
濾紙保藏法可應(yīng)用于細(xì)菌、酵母菌、絲狀真菌等的保藏,該法尤其適合一些對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高的菌種,保藏時(shí)間可達(dá)2年以上.濾紙保藏法可廣泛應(yīng)用于大、中、小等各類微生物實(shí)驗(yàn)室.