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控制菌檢查:白色念珠菌

發(fā)布時間:

2022-12-27

作者:

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控制菌檢查:白色念珠菌

 
1.供試液的制備和增菌培養(yǎng)
取供試品,按照“非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查制成1:10供試液”.取相當于1g或1毫升供試品的供試液,接種至適宜體積(經(jīng)方法適用性實驗確定的)沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中,混勻,30至35攝氏度培養(yǎng)3至5天.
 
2.選擇和分離培養(yǎng)
取上述培養(yǎng)物劃線接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上,30至35攝氏度培養(yǎng)24至48小時.
 
3.白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的菌落呈乳白色、偶見淡黃色,表面光滑有濃酵母氣味,培養(yǎng)時間稍久則菌落增大,顏色變深,質(zhì)地變硬或有褶皺,挑取疑似菌落接種至念珠菌顯色培養(yǎng)基平板上,培養(yǎng)24-48小時(必要時延長至72h),或采用其他適宜方法進一步鑒定.
 
4結(jié)果判斷
若沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上有疑似菌落生長,且疑似菌在念珠顯色培養(yǎng)基平板上生長的菌落呈陽性反應(yīng),應(yīng)進一步進行適宜的鑒定試驗,確證是否為白色念珠菌,若沙氏葡萄糖瓊脂平板上沒有菌落生長,或疑似菌在念珠顯色培養(yǎng)基平板上生長的菌落呈陰性反應(yīng),判供試品未檢出白色念珠菌.
 
 
5相關(guān)產(chǎn)品配方
5.1沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基
(動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物)10.0g
(葡萄糖)20.0g
pH5.6±0.2(25攝氏度)
5.2沙氏葡萄瓊脂培養(yǎng)基
(動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物)10.0g
Dextrose(葡萄糖)40.0g
Agar(瓊脂)15.0g
pH5.6±0.2(25攝氏度)
 
原理:葡萄糖提供碳源;動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物提供氮源;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑.
5.3沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基適用性檢查
分別接種不大于100cfu的白色念珠菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中,在30-35攝氏度培養(yǎng)短于72h,與對照培養(yǎng)基管比較,被檢培養(yǎng)基管試驗菌生長良好.
5.4.1培養(yǎng)基促生長能力檢查:用涂布法分別接種不大于100cfu的白色念珠菌于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上,在不超過24h30至35攝氏度培養(yǎng)下,白色念珠菌在被檢培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)特征應(yīng)與對照培養(yǎng)基一致.
5.4.2用涂布法分別接種不大于100cfu的白色念珠菌于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上,在不超過24h30至35攝氏度培養(yǎng)下,白色念珠菌在被檢培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對照培養(yǎng)基一致.
5.4.3沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基在“微生物計數(shù)限度檢查法”,接種白色念珠菌和黑曲霉不大于100cfu,培養(yǎng)溫度20-25攝氏度,培養(yǎng)基時間不超過5天,被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5-2范圍內(nèi),且菌落形態(tài)大小應(yīng)與對照培養(yǎng)基上的菌落一致.