關(guān)于2015版藥典菌種指導(dǎo)原則
發(fā)布時(shí)間：
2022-12-27
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什么牌子的培養(yǎng)基比較好
關(guān)于2015版藥典菌種指導(dǎo)原則
來(lái)自國(guó)內(nèi)或國(guó)外認(rèn)可的菌種保藏機(jī)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)菌株,或使用與標(biāo)準(zhǔn)菌株所有特性等效的商業(yè)派生菌株.
菌種的來(lái)源:CMCC—中國(guó)醫(yī)學(xué)菌種保藏中心(無(wú)菌檢查、限度檢查)CMCC(B)細(xì)菌 CMCC(F)真菌 ATCC—美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏中心
中國(guó)藥典2015版所涉獵的菌株大多數(shù)來(lái)自于CMCC,也有個(gè)別來(lái)自于ATCC,比如抗生素檢定方法里.注意:我們目前只賣(mài)目錄里有的菌株,目錄以外的都不會(huì)再賣(mài)或代購(gòu)！
3菌株的定義:菌株又稱(chēng)品系,表示任何由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞(即單個(gè)病毒粒子)繁殖而成的純種群體及其后代.因此,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱(chēng)為該菌種的一個(gè)菌株.根據(jù)菌株的定義,菌株實(shí)際上是某一微生物達(dá)到"遺傳性純"的標(biāo)志,一旦菌株發(fā)生變異,均應(yīng)標(biāo)上新的菌株名稱(chēng).菌株間在某些特性上存在著或多或少的差異.有一定的編號(hào).如生產(chǎn)蛋白酶的為枯草桿菌1398,生產(chǎn)淀粉酶的為枯草桿菌7658,同屬枯草桿菌,但其作用不同.
4菌株的傳代和使用
4.1 2015版中國(guó)藥典規(guī)定工作菌種傳代次數(shù)不得超過(guò)5次.超過(guò)5次容易變異.
4.2 1代:是指將活的培養(yǎng)物接種到新鮮培養(yǎng)基中,任何亞培養(yǎng)的形式均被認(rèn)為是轉(zhuǎn)種或傳代一次.
凍干菌種(0代)→增菌培養(yǎng)18至24小時(shí)蘇醒(1代)→增菌培養(yǎng)18至24小時(shí)復(fù)壯(2代)→劃線(xiàn)傳代(3代)可作為工作菌種
4.3標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株可用于制備每月或每周一次轉(zhuǎn)種的工作菌株.第一代不可作為工作菌株使用.用液氮冷凍保存可達(dá)5至10年,2代可保存一個(gè)月.
4.4冷凍菌株一旦解凍轉(zhuǎn)種制備工作菌株后,不得重新冷凍或再次使用.
4.5工作菌株不可代替標(biāo)準(zhǔn)菌株,標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)衍生物僅可作工作菌株.
5.菌種的保存藥典要求:實(shí)驗(yàn)用菌種應(yīng)采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存,以保證試驗(yàn)菌種的生物學(xué)特性.一般保存方式如下:冷藏、冷凍、凍干保藏.
5.1冷藏:是一種短期有效的保藏方式,一般在冰箱2-8攝氏度保存,工作菌懸液和稀釋液均用此方法進(jìn)行保藏.保存方式可以選擇如下:肉湯(TSB、胨水)；穿刺(一般用于厭氧菌保藏)斜面(TSA\SDA)劃平板(一般為了得到單顆菌落)
5.2冷凍:在低溫下保藏,需要加入保護(hù)劑,例如甘油,一般在-30攝氏度-80攝氏度,或液氮中保存.
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