中國藥典2015版沙門氏菌的檢測

發(fā)布時間：

2022-12-27

作者：

中國藥典2015版沙門氏菌的檢測

供試液制備和增菌培養(yǎng)

取10克或10毫升供試品直接或處理后接種至適宜體積(經(jīng)方法適用性試驗確定)的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中,混勻,30至35攝氏度培養(yǎng)18至24小時.(目的:樣品中沙門氏菌的復(fù)壯與增菌)

選擇和分離培養(yǎng)基

取上述培養(yǎng)物0.1毫升接種至10毫升RV沙門增菌液體培養(yǎng)基中,30至35攝氏度培養(yǎng)18至24小時.取少量RV沙門增菌液體培養(yǎng)基培養(yǎng)物劃線接種于木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基平板上,30至35攝氏度培養(yǎng)18至48小時小時,或采取其他適宜方法進一步鑒定.

圖:RV沙門增菌液體培養(yǎng)基

左圖:滅制后未接種的培養(yǎng)基,藏藍色

右圖:接種乙型副傷寒沙門氏菌后液體狀態(tài),溶液渾濁.

圖:木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基

菌落為淡紅色或無色、透明或半透明、中心有或無黑色.

原理:酵母浸出粉提供氮源、維生素、生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓；木塘、乳糖、蔗糖為可發(fā)酵糖類,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈黃色；脫氧膽酸鈉抑制革蘭氏陽性菌,但不影響沙門氏菌的生長；硫代硫酸鈉可以被某些細菌還原硫化氫,與枸櫞酸鐵銨中的鐵鹽生成黑色硫化鐵；

瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；酚紅為p小時指示劑.

用接種針挑選疑似菌落于三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基高層斜面上進行斜面和高層穿刺接種,培養(yǎng)18至24小時,或采用其他適宜方法進一步鑒定.

3.結(jié)果判斷

若XLD上有疑似菌落生長,且三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基上的斜面為紅色,底層為黃色,或斜面為黃色、底層黃色或黑色,應(yīng)進一步進行適宜的鑒定試驗,確證是否為沙門氏菌.

如果平板上沒有菌落生長,或雖有菌落生長但鑒定結(jié)果為陰性,或三糖鐵培養(yǎng)基的斜面未見紅色、底層未見黃色；或斜面黃色、底層未見黃色或黑色,判定供試品未檢出沙門菌.

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